[发明专利]鸭坦布苏病毒病E-ELISA检测试剂盒及其制备方法在审
申请号: | 201810399078.3 | 申请日: | 2013-07-11 |
公开(公告)号: | CN108627645A | 公开(公告)日: | 2018-10-09 |
发明(设计)人: | 张云;刘明;陈志峰 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心) |
主分类号: | G01N33/569 | 分类号: | G01N33/569;G01N33/68;G01N33/558;G01N33/531 |
代理公司: | 中科专利商标代理有限责任公司 11021 | 代理人: | 张国梁 |
地址: | 150069 黑*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | 本发明涉及以一种鸭坦布苏病毒E蛋白为包被抗原的酶联免疫吸附试验(E‑ELISA)检测试剂盒、其制备方法及其应用。本发明试剂盒包含标准阳性对照鸭血清、标准阴性对照鸭血清、坦布苏病毒E蛋白(SEQ ID No.2)所包被的ELISA板、羊抗鸭酶标二抗、TMB底物显色液、终止液。本发明制备的E‑ELISA检测试剂盒用于鸭坦布苏病毒感染后的抗体检测。 | ||
搜索关键词: | 制备 检测试剂 鸭血清 酶联免疫吸附试验 病毒 包被抗原 标准阴性 病毒感染 发明试剂 抗体检测 阳性对照 病毒病 终止液 包被 二抗 鸭酶 羊抗 应用 | ||
【主权项】:
1.原核表达的鸭坦布苏病毒TA株E蛋白在制备鸭坦布苏病毒病E‑ELISA检测试剂盒中的应用,其中所述试剂盒包含标准阳性对照鸭血清、标准阴性对照鸭血清、鸭坦布苏病毒TA株E蛋白所包被的ELISA板、羊抗鸭酶标二抗及其他试剂,其中所述标准阳性对照鸭血清为提取自用鸭坦布苏病毒免疫的SPF鸭的血清,所述标准阴性对照鸭血清为提取自SPF鸭的血清,所述鸭坦布苏病毒TA株E蛋白所包被的ELISA板通过用在原核表达系统中重组表达的鸭坦布苏病毒TA株E蛋白包被ELISA板制得,其中所述鸭坦布苏病毒TA株E蛋白通过将SEQ ID No.1所示的编码坦布苏病毒TA株E蛋白的核苷酸序列克隆在原核细胞表达载体中并在原核细胞中表达制得,并且所述羊抗鸭酶标二抗为HRP标记的羊抗鸭二抗,所述其他试剂包括样品稀释液、10×浓缩洗液、TMB底物显色液和终止液,其中所述10×浓缩洗液为100mmol/L PBST,pH7.4,所述样品稀释液由所述10×浓缩洗液按照1∶9V/V稀释获得,所述终止液为2mol/L硫酸溶液。
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