[发明专利]一种鼻上皮干细胞培养方法及鼻上皮干细胞增殖培养基有效
申请号: | 201810400123.2 | 申请日: | 2018-04-28 |
公开(公告)号: | CN108753681B | 公开(公告)日: | 2022-02-15 |
发明(设计)人: | 李春炜;洪玥;何根;谢曦 | 申请(专利权)人: | 中山大学附属第一医院 |
主分类号: | C12N5/071 | 分类号: | C12N5/071 |
代理公司: | 广州新诺专利商标事务所有限公司 44100 | 代理人: | 曹爱红 |
地址: | 510080 *** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种鼻上皮干细胞培养方法,包括以下步骤:1)在培养皿中铺被滋养层细胞;2)从鼻黏膜组织中分离鼻上皮干细胞原代细胞;3)将鼻上皮干细胞原代细胞铺在滋养层细胞上,将培养基替换为鼻上皮干细胞增殖培养基,移除其余的组织细胞;4)当鼻上皮干细胞增殖到80%密度,通过胰酶消化,传代继续扩增;5)将鼻上皮干细胞转移到气‑液相培养体系和PneumaCult‑ALI分化培养基进行分化培养。本发明还公开了一种鼻上皮干细胞增殖培养基,包括以下组分:DMEM/F12、胎牛血清、青霉素、链霉素、胰岛素、表皮生长因子、氢化可的松、3,3',5‑三碘‑L‑甲腺原氨酸钠、ROCK抑制剂。本发明为鼻上皮干细胞临床移植的转化应用提供关键的实施基础。 | ||
搜索关键词: | 一种 上皮 干细胞 培养 方法 增殖 培养基 | ||
【主权项】:
1.一种鼻上皮干细胞培养方法,其特征在于,包括以下步骤:1)在培养皿中铺滋养层细胞;2)从鼻黏膜组织中分离鼻上皮干细胞原代细胞;3)将鼻上皮干细胞原代细胞铺在滋养层细胞上,将培养基替换为鼻上皮干细胞增殖培养基,移除其余的组织细胞;4)当鼻上皮干细胞增殖到80%密度,通过胰酶消化,传代继续扩增;5)将鼻上皮干细胞转移到气‑液相培养体系和PneumaCult‑ALI分化培养基进行分化培养。
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