[发明专利]检测眼部微量生物样本中CMV感染的试剂盒和方法有效
| 申请号： | 201810425791.0 | 申请日： | 2018-05-07 |
| 公开（公告）号： | CN108950061B | 公开（公告）日： | 2019-11-26 |
| 发明（设计）人： | 张培;冯丽娜;黄琛;王薇 | 申请（专利权）人： | 北京大学第三医院 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/6806;C12Q1/6851;C12N15/11 |
| 代理公司： | 11129 北京海虹嘉诚知识产权代理有限公司 | 代理人： | 吴泳历<国际申请>=<国际公布>=<进入 |
| 地址： | 100191 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明“用于检测眼部微量生物样本中CMV感染的试剂盒和方法”，涉及眼部病毒感染的分子检测技术，特别是一种微量生物样本DNA的提取方法，所述微量生物样本指体积不超过10ul‑200ul的液体样本或体积不超过1mm3的固体类样本。提取的DNA作为PCR检测模版，能够检测到眼部病毒感染情况，准确性达到80％以上，为后续采取合适的治疗手段提供可靠依据，减少治疗手段的盲目性。 | ||
| 搜索关键词： | 微量生物样本 眼部 病毒感染 试剂盒 检测 分子检测技术 液体样本 模版 治疗 样本 | ||
【主权项】：
1.一种用于检测眼部微量样本CMV感染的试剂盒，其特征在于：包含用于制备眼部微量样本DNA模板的试剂组以及PCR扩增试剂；/n所述试剂组包含如下试剂；/n裂解缓冲液：含10％SDS的Tris饱和酚,/n洗脱缓冲液1：饱和酚:氯仿:异戊醇以体积比25:24:1的混合液；/n洗脱缓冲液2：无水乙醇,/n洗脱缓冲液3：pH8.0,含1mmol/LEDTA的10mmol/L Tris-HCl溶液；/n所述PCR扩增试剂含有以下引物探针组，序列如下：/nPrimer-F：TCGTGAAACACGCTCGCTTT，/nPrimer-R：TGGTCGGTACACGGTCCCTT，/n探针：GACCCGGTGTTCCTTGGAGA；/n以及为每个检测反应设置对照反应的对照模版，具体如下：/n阳性对照模版:已知CMV病毒DNA片段，用于对检测体系和仪器的质量控制，保证结果的准确性，避免假阴性结果/n阳性对照模版:阳性眼部体液；/n空白对照模版：超纯水；/n阴性对照模版：阴性眼部液体样本；/n弱阳性对照模版：阳性眼部体液的稀释液，其临界值设置在△T＝38-40；/n所述眼部微量样本指体积不超过10ul-50ul的液体样本或体积不超过1×1mm的固体类样本；/n所述液体样本指眼部分泌物、房水、泪液和/或玻璃体；/n所述固体类样本指视网膜、角膜内皮、翼状胬肉、结膜、虹膜和/或眼部肿物。/n
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