[发明专利]一种用于检测布氏菌的荧光定量重组酶聚合酶扩增方法在审
| 申请号： | 201810434374.2 | 申请日： | 2018-05-08 |
| 公开（公告）号： | CN108753997A | 公开（公告）日： | 2018-11-06 |
| 发明（设计）人： | 陈义平;秦立得;南文龙;陈羽琪 | 申请（专利权）人： | 中国动物卫生与流行病学中心 |
| 主分类号： | C12Q1/689 | 分类号： | C12Q1/689;C12Q1/6844;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/01 |
| 代理公司： | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人： | 汤东凤 |
| 地址： | 266032 *** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明提供通用型布氏菌的荧光定量RPA快速检测方法，本发明引物组及方法的优点如下：1)高效灵敏：20min即可完成扩增，扩增模板的最低检出限为10个拷贝；2)特异性强：采用PRA引物组和荧光探针特异性对布氏菌进行检测，与常见非布氏菌株无交叉反应；3)操作简便：配置好的RPA反应体系，设置好反应程序，置于荧光定量PCR仪或RPA反应仪中。4)高通量：可一次性进行大量样品检测，结果判定与统计由程序自动完成。 | ||
| 搜索关键词： | 布氏菌 荧光定量 引物组 扩增 荧光定量PCR仪 反应程序 高效灵敏 交叉反应 结果判定 快速检测 扩增模板 特异性强 样品检测 荧光探针 自动完成 反应仪 高通量 检出限 聚合酶 通用型 一次性 重组酶 检测 拷贝 配置 统计 | ||
【主权项】：
1.一种用于检测布氏菌的荧光定量RPA引物组和荧光探针，其特征在于，所述的引物和探针的信息如下：BCSP 31‑F:5'‑TGCATCCCGGCGCAGAACGCTTTTACAAGGAA‑3'、BCSP 31‑R:5'‑ATAACGAGCTGCCGCAATGTCACCCTTCAATT‑3'、BCSP 31‑Probe:5'‑GCGGGCGTGCTGAAATAATCCCTCAAT GA‑FAM‑dT‑THF‑GG‑BHQ1‑dTTCCTGATATCTTA‑dSpacer‑3'；其中，FAM‑dT表示携带有荧光素基团的胸腺嘧啶核苷酸，THF表示四氢呋喃连接子，BHQ1‑dT表示携带有荧光淬灭基团BHQ1的胸腺嘧啶核苷酸，3'用dSpacer阻断链的延伸。
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