[发明专利]基于多个时间分辨荧光技术连用的共表达重组人蛋白生物学活性与滴度检测方法

摘要

本发明公开了一种基于多个时间分辨荧光技术连用的共表达重组人蛋白生物学活性与滴度检测方法，包括如下步骤：一，采用以下方法中的任意两种或三种：方法一、竞争法测定一种或两种重组人蛋白；方法二、夹心法测定一种或两种重组人蛋白；方法三、夹心法测定两种重组人蛋白融合蛋白结合体；二，设置荧光波长，读取荧光值；三，数据处理：根据荧光的比值与标准品的浓度得到标准曲线，计算样品浓度；四，样品排序：将上述方法的检测值赋为样品X,Y及Z轴坐标，得样品在坐标系中位置；划定可接受标准区间，落入该区间样品皆符合要求。本发明可系统、高通量地评价共表达产生的重组人蛋白各组分的活性/滴度，以支持生产细胞株克隆筛选和纯化工艺优化。

主权项

1.一种基于多个时间分辨荧光技术连用的共表达重组人蛋白生物学活性与滴度检测方法，其特征在于，包括如下步骤：第一步，采用以下方法中的任意两种或三种组合：方法一、竞争法测定其中一种或两种重组人蛋白；方法二、夹心法测定其中一种或两种重组人蛋白；方法三、夹心法测定两种重组人蛋白融合蛋白的结合体；第二步，设置荧光波长，读取荧光值；第三步，数据处理：根据荧光的比值与标准品的浓度进行四参数拟合，得到标准曲线，根据标准曲线计算待测样品的浓度；第四步，样品排序：采用坐标系将方法组合中每一个方法的检测值分别赋为样品X,Y以及Z轴坐标，得出样品在坐标系中位置；根据经验或实验结果，划定可接受标准区间，凡落入这个区间的样品，皆符合活性评价或筛选要求。