[发明专利]一种皮张中古DNA的提取方法及试剂盒有效
| 申请号： | 201810465329.3 | 申请日： | 2018-05-16 |
| 公开（公告）号： | CN108410861B | 公开（公告）日： | 2022-02-22 |
| 发明（设计）人： | 付巧妹;曹鹏;戴情燕 | 申请（专利权）人： | 中国科学院古脊椎动物与古人类研究所 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 北京路胜元知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11669 | 代理人： | 罗巍;路兆强 |
| 地址： | 100044 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种皮张中古DNA的提取方法，包括样品预处理步骤、消化蛋白步骤、吸附步骤及洗脱步骤；所述消化蛋白步骤采用proteinK/EDTA消化液，所述protein K/EDTA消化液为包含蛋白酶K、EDTA、Tween 20的水溶液；所述吸附步骤采用的吸附体系包含Binding buffer、乙酸钠溶液、以及浸泡于所述Binding buffer和乙酸钠的混合液中的带滤膜的吸附柱；所述Binding buffer为包含盐酸胍、异丙醇或无水乙醇、Tween20的水溶液；所述滤膜为硅基质滤膜；所述洗脱步骤采用TET洗脱液，所述TET洗脱液是包含三羟甲基氨基甲烷‑HCl、EDTA、Tween 20的水溶液。本发明方法与现有技术相比，在古皮张样品相同情况下，可获得现有技术12倍以上DNA分子总量，因此可用更少的皮张样品用量，提取效率更高。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 皮张 中古 dna 提取 方法 试剂盒 | ||
【主权项】：
1.一种皮张中古DNA的提取方法，包括样品预处理步骤、消化蛋白步骤、吸附步骤及洗脱步骤；其特征在于：所述消化蛋白步骤采用protein K/EDTA消化液，所述protein K/EDTA消化液为包含蛋白酶K、EDTA、Tween 20的水溶液；所述吸附步骤采用的吸附体系包含Binding buffer、乙酸钠溶液、以及浸泡于所述Binding buffer和乙酸钠的混合液中的带滤膜的吸附柱；所述Binding buffer为包含盐酸胍、异丙醇或无水乙醇、Tween 20的水溶液；所述滤膜为硅基质滤膜；所述洗脱步骤采用TET洗脱液，所述TET洗脱液是包含三羟甲基氨基甲烷‑HCl、EDTA、Tween 20的水溶液。
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