[发明专利]一种用于提取沉香高质量DNA的方法有效
申请号: | 201810466650.3 | 申请日: | 2018-05-16 |
公开(公告)号: | CN108624588B | 公开(公告)日: | 2021-09-21 |
发明(设计)人: | 魏建和;冯剑;刘洋洋;杨云;康勇 | 申请(专利权)人: | 中国医学科学院药用植物研究所海南分所 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人: | 陈欢 |
地址: | 571500 海南省*** | 国省代码: | 海南;46 |
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摘要: | 本发明公开了一种用于提取沉香高质量DNA的方法,包括了沉香样品消毒除杂、液氮研磨、温浴、离心、醇沉、洗涤溶解及定向PCR扩增等步骤,可从含树脂等次生代谢物质的沉香尤其是树脂含量高、形成(存放)时间久及深加工产品(或残留物)中提取高质量的DNA。本发明既提高了沉香DNA的质量和数量,也能从深加工残留物中提取DNA,可直接应用于分子生物学和中药鉴定学的研究,为沉香物种鉴定提供了新方法。 | ||
搜索关键词: | 一种 用于 提取 沉香 质量 dna 方法 | ||
【主权项】:
1.一种用于提取沉香高质量DNA的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)沉香样品消毒,除杂,充氮,磨成沉香粉末;(2)向步骤(1)所得样品中加入DNA提取液,混匀后水浴温浴,室温冷却,再加入DNA分离液,混匀,离心,收集上清液;(3)向上清液中加入预冷DNA沉淀液,抽吸混匀,静置沉淀;(4)室温冷却,加入DNA洗涤液,冰浴后转移至DNA吸附柱中,离心,弃去废液;(5)向步骤(4)的DNA吸附柱中加入乙醇溶液,离心,弃去废液;(6)使步骤(5)的DNA吸附柱中的溶剂挥发后,加入预热的DNA溶解液,离心,取上清,即得沉香总DNA;(7)将步骤(6)所得DNA作为模板DNA,加入到PCR反应体系,定向扩增得到DNA目的片段。
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