[发明专利]堪萨斯分枝杆菌的LAMP检测引物组、检测试剂盒及其检测方法

摘要

本发明提供一种检测堪萨斯分枝杆菌的LAMP引物组，包括外引物F3、外引物B3、内引物FIP、内引物BIP、环引物LF和环引物LB。本发明还提供包含上述引物组的检测试剂盒及其检测方法。检测试剂盒包括引物液、反应液、DNA聚合酶、阴阳性对照和荧光染料(或显色剂)。检测方法是通过提取待测样品的DNA，然后在DNA聚合酶和引物组存在的情况下，对样品DNA模板在65℃左右进行等温扩增，最后通过实时荧光定量PCR仪检测荧光或加入显色剂观察管内颜色变化来确定待检样品中是否含有堪萨斯分枝杆菌。本发明提供的试剂盒和检测方法具有很好的特异性和灵敏性，扩增快速、高效，易于操作，可用于临床标本中堪萨斯分枝杆菌的快速检测。

主权项

1.一种堪萨斯分枝杆菌的LAMP检测引物组，其特征在于，针对堪萨斯分枝杆菌特有的ECHT基因编码序列设计并优化，所述检测引物组包括外引物F3、外引物B3、内引物FIP、内引物BIP、环引物LF和环引物LB，其核酸序列分别如下所示：外引物F3：5’‑GACTGTTGGCGAGTTGGT‑3’外引物B3：5’‑GTCCTGGAACGTCTGCTC‑3’内引物FIP：5’‑GGTGTGGCACATTGCGACAGATATAACTCGAACAGCAC‑3’内引物BIP：5’‑CGGATCAGCGGTATGACGGCCGGCTGCCCGATTAGAT‑3’环引物LF：5’‑GTTCTGCGACGGCGATTC‑3’环引物LB：5’‑GGGATGCGTTGTCCACCA‑3’。