[发明专利]一种用于核酸实时恒温扩增的试剂、扩增体系及其扩增方法和应用在审
申请号: | 201810483345.5 | 申请日: | 2018-05-18 |
公开(公告)号: | CN108642145A | 公开(公告)日: | 2018-10-12 |
发明(设计)人: | 齐飞虎;张翼飞 | 申请(专利权)人: | 上海默礼生物医药科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6844 | 分类号: | C12Q1/6844;C12Q1/70;C12R1/93 |
代理公司: | 上海申新律师事务所 31272 | 代理人: | 严罗一 |
地址: | 200120 上海市浦东新区周*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明涉及一种用于核酸恒温扩增的试剂,其包括RNA聚合酶、带逆转录活性DNA聚合酶和RNase H;其中,所述带逆转录活性DNA聚合酶具备5'~3'DNA聚合活性和逆转录活性以及5'~3'外切酶活性;该试剂还包括引物和荧光探针,所述引物包括带RNA启动子识别序列的引物和第二cDNA合成引物,所述荧光探针选自TaqMan探针、Molecular Beacon探针。本发明还涉及含有上述试剂的核酸恒温扩增体系及其扩增方法,以及含有该核酸恒温扩增体系的试剂盒及其应用。本发明使用RNA聚合酶、带逆转录活性DNA聚合酶和RNase H实现可控的RNA和DNA恒温扩增,并把该恒温扩增和荧光探针技术结合,其可在对靶RNA的扩增过程中进行实时荧光检测,并且整个过程在同一反应体系中完成,实现核酸的定量检测,适于临床推广和应用。 | ||
搜索关键词: | 恒温扩增 核酸 逆转录 引物 活性DNA 聚合酶 扩增 荧光探针 应用 实时荧光检测 荧光探针技术 外切酶活性 定量检测 聚合活性 扩增体系 可控的 试剂盒 对靶 探针 | ||
【主权项】:
1.一种用于核酸实时恒温扩增的试剂,其特征在于,包括RNA聚合酶、带逆转录活性DNA聚合酶和RNase H;其中,所述带逆转录活性DNA聚合酶具备5'~3'DNA聚合活性和逆转录活性以及5'~3'外切酶活性。
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