[发明专利]一种利用人诱导多能干细胞获得富含视锥及视杆细胞的类视网膜组织的方法有效
| 申请号： | 201810510145.4 | 申请日： | 2018-05-24 |
| 公开（公告）号： | CN108795864B | 公开（公告）日： | 2021-08-24 |
| 发明（设计）人： | 钟秀风;李桂兰;谢冰冰;彭福华 | 申请（专利权）人： | 中山大学中山眼科中心;广州宏畅生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/079 | 分类号： | C12N5/079 |
| 代理公司： | 广州科粤专利商标代理有限公司 44001 | 代理人： | 刘明星 |
| 地址： | 510060 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种利用人诱导多能干细胞获得富含视锥及视杆细胞的类视网膜组织的方法。它包括将hiPSCs消化得到细胞沉淀，再将细胞沉淀悬浮培养得到拟胚体；拟胚体再接种至预先用Matrigel包被的培养皿中，在诱导培养液中诱导分化，获得神经视网膜(NR)和RPE；将NR和RPE再挑起，悬浮培养，获得3D类视网膜包括NR组织，随后在没有视黄酸的优化培养液中继续悬浮培养，NR分化出所有视网膜细胞，包括高度成熟的光感受器细胞，Rhodopsin阳性视杆细胞，L/M OPSIN阳性红绿锥细胞和S‑OPSIN阳性蓝锥细胞,尤其获得了富含红绿视锥及视杆细胞的类视网膜组织。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 利用 诱导 多能 干细胞 获得 富含 细胞 视网膜 组织 方法 | ||
【主权项】：
1.一种利用人诱导多能干细胞获得富含视锥及视杆细胞的类视网膜组织的方法，其特征在于，包括将hiPSCs消化得到细胞沉淀，再将细胞沉淀悬浮培养得到拟胚体；拟胚体再接种至预先用Matrigel包被的培养皿中，在诱导培养液中诱导分化，获得神经视网膜(NR)和视网膜色素上皮(RPE)；将NR和RPE再挑起，悬浮培养，获得3D类视网膜包括NR组织和RPE，在不添加视黄酸的培养液中继续悬浮培养，NR发育出所有视网膜细胞，包括高度成熟的光感受器细胞，Rhodopsin阳性视杆细胞和L/M OPSIN阳性红绿视锥细胞和S‑OPSIN阳性蓝视锥细胞，尤其获得富含红绿视锥细胞和视杆细胞的视网膜组织。
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