[发明专利]一种利用内置式超声制备脂肪来源细胞外基质的方法

摘要

本发明属于再生医学技术领域，公开了一种利用内置式超声制备脂肪来源细胞外基质的方法，包括离心、超声波破碎、离心收集等步骤。本发明所述制备方法利用超声波破碎脂肪组织中大部分成熟脂肪细胞，去除成熟脂肪细胞和SVF细胞，制备得到ECM，有效避免了操作繁琐导致的ECM含量过低和细胞因子损失。本发明方法不加入外源性化学物质制备富含细胞因子的ECM，且制得的ECM中不含有外源性物质，能提高自体脂肪移植和直接作为生物填充材料的有效性。由本发明方法制备得到的脂肪源ECM材料可用于自体移植疗法，降低了脂肪移植的并发症，提高了移植脂肪的存活率，具有广阔的应用前景。

主权项

1.一种利用内置式超声制备脂肪来源细胞外基质的方法，其特征在于，包括如下步骤：S1.将脂肪组织于1000～10000rpm条件下离心1～5min，离心后若分为三层，分别为顶层油脂、中间层混合物和底层肿胀液，则弃去底层肿胀液，过滤去除顶层油脂并取滤液；若不分层或分层不明显，则重复此步骤；S2.将S1所得滤液超声破碎，超声破碎条件为30～200W、1～100s；再继续超声破碎，超声破碎条件为10～100W、1～60s；温度25～38℃；S3.将经S2超声破碎后的脂肪混合物于1000～10000rpm条件下离心3～10min；S4.经S3离心后，若脂肪混合物分为三层，分别为顶层油脂、中间层混合物和底层肿胀液，且油脂层体积占脂肪混合物总体积60%以上，则弃去顶层油脂，取中间层混合物，加等体积生理盐水混匀，于4000～10000rpm条件下离心3～8min；弃去离心沉淀，收集上层浅黄色絮状物，即得富含细胞因子的细胞外基质材料；若脂肪混合物不分层或分层不明显，则重复S2～S3。