[发明专利]一种高产5-氨基乙酰丙酸生产菌株的构建方法及应用在审
| 申请号： | 201810545863.5 | 申请日： | 2018-05-31 |
| 公开（公告）号： | CN108841852A | 公开（公告）日： | 2018-11-20 |
| 发明（设计）人： | 潘韵;陈泽田;仵桂仓;郑文官;李莉玲;沈珊珊 | 申请（专利权）人： | 河南邑鸿善成生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/81 | 分类号： | C12N15/81;C12N15/90;C12N15/54;C12N1/19;C12P13/00;A23K10/18;A23K50/30;A23K50/60;C12R1/865 |
| 代理公司： | 焦作市科彤知识产权代理事务所(普通合伙) 41133 | 代理人： | 聂智良 |
| 地址： | 454950 河南省*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种高产5‑氨基乙酰丙酸生产菌株的构建方法及应用，本发明以酿酒酵母by4741为宿主，通过克隆高活性酿酒酵母5‑ALA合成酶hem1基因，将hem1基因克隆进入表达载体Prs426。启动子选择组成型启动子TDH3P。此含有hem1基因的质粒线性化后，通过电转化方式转入酿酒酵母。得到的转化子即为本发明方法所需的基因工程菌株。并将菌株用于5‑ALA的生产和动物饲料的添加。本发明的有益效果是：首次将5‑ALA合成酶基因成功导入到真核细菌酿酒酵母当中，在之前的研究当中未有报道。构建的高产5‑ALA重组酿酒酵母，得到5‑ALA的产量达到2.0 g/L，和其他研究相比，5‑ALA的产量相对较高。构建的高产5‑ALA重组酿酒酵母，可以应用于微生物发酵饲料行业中，具有无污染、绿色环保等特点。 | ||
| 搜索关键词： | 酿酒酵母 构建 高产 重组酿酒酵母 生产菌株 基因 应用 微生物发酵饲料 宿主 氨基乙酰丙酸 基因工程菌株 组成型启动子 质粒线性化 表达载体 动物饲料 基因克隆 绿色环保 电转化 高活性 启动子 转化子 菌株 真核 细菌 克隆 转入 研究 成功 生产 | ||
【主权项】：
1.一种高产5‑氨基乙酰丙酸生产菌株的构建方法，其特征在于：弱化5‑氨基乙酰丙酸生产菌株中琥珀酰辅酶A的合成途径关键酶的活性；所述琥珀酰辅酶A的合成途径关键酶是琥珀酸合成酶。
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