[发明专利]M8Sac71抗体及其制备方法与应用在审

专利信息
申请号: 201810549075.3 申请日: 2018-05-31
公开(公告)号: CN108690137A 公开(公告)日: 2018-10-23
发明(设计)人: 李翠玲;李冰清;岳盈盈;宋楠楠;林玮;王玮玮 申请(专利权)人: 山东省医学科学院基础医学研究所
主分类号: C07K16/40 分类号: C07K16/40;C07K16/06;G01N33/573
代理公司: 济南鼎信专利商标代理事务所(普通合伙) 37245 代理人: 彭成
地址: 250062 山*** 国省代码: 山东;37
权利要求书: 查看更多 说明书: 查看更多
摘要: 发明公开了一种M8Sac71抗体,其制备方法为:(一)MARCH8Sac71肽段的合成:制备MARCH8Sac71肽段,该肽段的氨基酸序列如下所示:Ac‑T(Sac)ITPSSQDICRICHCEGDC‑NH2;(二)MARCH8Sac71肽段与BSA或KLH偶联;(三)免疫兔子制备抗体;(四)抗体的纯化:上述得到的血清,先利用非乙酰化肽段进行负筛选,再利用MARCH8Sac71肽段进行正筛选,得抗体,即为M8Sac71抗体。本发明的M8Sac71抗体,通过dot‑blot和竞争性实验证明了M8Sac71抗体的特异性,并进一步证明与丝氨酸乙酰化酶YopJ共转的MARCH8乙酰化水平大大提高,印证了M8Sac71抗体的有效性,可应用于检测MARCH8上的71位丝氨酸位点是否被乙酰化。
搜索关键词: 抗体 肽段 制备 乙酰化 筛选 氨基酸序列 免疫兔子 丝氨酸乙 乙酰化肽 丝氨酸 再利用 酰化酶 血清 偶联 位点 应用 合成 检测
【主权项】:
1.一种M8Sac71抗体的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:(一)MARCH8 Sac71肽段的合成:制备MARCH8 Sac71肽段,该肽段的氨基酸序列如下所示:Ac‑T(Sac)ITPSSQDICRICHCEGDC‑NH2;(二)MARCH8 Sac71肽段与BSA或KLH偶联:将上述合成的MARCH8 Sac71肽段与BSA或KLH偶联,得偶联产物;(三)免疫兔子制备抗体,包括以下步骤:(1)第一次免疫(0day):用偶联产物免疫兔子,免疫方式为:四肢腹侧4处注射,每只兔子的用量为:400μg/只的偶联产物;(2)第二次免疫(28day):第28天,进行第二次免疫,免疫方式为:四肢腹侧4处注射,每只兔子的用量为:200μg/只的偶联产物;(3)第三次免疫(49day):第49天,进行第三次免疫,免疫方式为:静脉注射,每只兔子的用量为:400μg/只的偶联产物;(4)采血:第59~61天,兔子耳缘静脉取血,经ELISA检测效价符合要求后,颈总动脉采血,制备血清;(四)抗体的纯化:上述得到的血清,先利用非乙酰化肽段进行负筛选,再利用MARCH8 Sac71肽段进行正筛选,得抗体,即为M8Sac71抗体;所述非乙酰化肽段的氨基酸序列如下所示:Ac‑TSITPSSQDICRICHCEGDC‑NH2。
下载完整专利技术内容需要扣除积分,VIP会员可以免费下载。

该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于山东省医学科学院基础医学研究所,未经山东省医学科学院基础医学研究所许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服

本文链接:http://www.vipzhuanli.com/patent/201810549075.3/,转载请声明来源钻瓜专利网。

×

专利文献下载

说明:

1、专利原文基于中国国家知识产权局专利说明书;

2、支持发明专利 、实用新型专利、外观设计专利(升级中);

3、专利数据每周两次同步更新,支持Adobe PDF格式;

4、内容包括专利技术的结构示意图流程工艺图技术构造图

5、已全新升级为极速版,下载速度显著提升!欢迎使用!

请您登陆后,进行下载,点击【登陆】 【注册】

关于我们 寻求报道 投稿须知 广告合作 版权声明 网站地图 友情链接 企业标识 联系我们

钻瓜专利网在线咨询

周一至周五 9:00-18:00

咨询在线客服咨询在线客服
tel code back_top