[发明专利]表面偶联心肌肌钙蛋白抗原的磁性高分子微球及其在检测血清中心肌肌钙蛋白中的应用在审
| 申请号： | 201810552662.8 | 申请日： | 2018-05-31 |
| 公开（公告）号： | CN108593938A | 公开（公告）日： | 2018-09-28 |
| 发明（设计）人： | 徐力;郭轶;刘鸿翔;徐婉琦 | 申请（专利权）人： | 吉林大学 |
| 主分类号： | G01N33/68 | 分类号： | G01N33/68;G01N33/531 |
| 代理公司： | 长春吉大专利代理有限责任公司 22201 | 代理人： | 刘世纯;王恩远 |
| 地址： | 130012 吉*** | 国省代码： | 吉林;22 |
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| 摘要： | 一种表面偶联心肌特异性肌钙蛋白抗原的磁性高分子微球及其在检测血清中心肌特异性肌钙蛋白中的应用，属于生物技术领域。本发明基于化学偶联法将心肌特异性肌钙蛋白抗原(cTnT抗原)偶联到磁性高分子微球表面，从而制备表面具有cTnT抗原的功能化磁性高分子微球，该微球可用于血清中心肌特异性肌钙蛋白浓度的检测。本发明具快速获取样品、多参数分析、高分辨率等优点，本检测方法操作简便、可靠性强、获取数据量大，而磁性高分子微球的应用，更是简化了操作程序、减少非特异性吸附，本检测手段应用竞争模式更是节省了试剂的损耗。 | ||
| 搜索关键词： | 磁性高分子微球 检测 抗原 血清 偶联 肌钙蛋白抗原 肌钙蛋白 心肌 应用 非特异性吸附 生物技术领域 心肌肌钙蛋白 多参数分析 肌肌钙蛋白 操作程序 高分辨率 化学偶联 获取数据 竞争模式 快速获取 手段应用 功能化 可用 微球 制备 | ||
【主权项】：
1.一种表面偶联心肌特异性肌钙蛋白抗原的磁性高分子微球，其特征在于：是取磁性高分子微球悬液1mL，其中微球的数量为1.074×106～1.074×107，悬液为PBS溶液，于洗涤缓冲液中磁吸洗涤，弃去上清杂质；再向其中加入20～500μL的活化缓冲液，振荡20～40s，充分混匀后静置3～10min，磁吸弃上清，重复活化步骤2～3次；再加入20～500μL的偶联缓冲液、5～50μL的EDC水溶液、5～50μL的NHS水溶液，于常温空气振荡培养箱孵育10～50min，磁吸弃去上清；再加入20～500μL的偶联缓冲液和300～600ng的cTnT抗原充分混匀，于空气振荡培养箱孵育1～3h，期间每隔10～20min取出EP管于漩涡混匀器混匀，磁吸弃上清，PBS洗涤2～3次；然后加入300～600μL的封闭液，于空气振荡培养箱孵育1～3h，期间每隔10～20min取出EP管于漩涡混匀器混匀；最后磁吸去上清，加入1mL的保存缓冲液于4℃冰箱保存，得到偶联cTnT抗原的功能化磁性高分子微球。
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