[发明专利]一种双核铀酰配合物在ATP分析中的应用

摘要

本发明公开了一种双核铀酰配合物在ATP分析中的应用，属于生物化学分析检测方法技术领域。包括以下步骤：确定检测ATP的最优条件；配制BUIPTP检测底液；绘制测定ATP的标准曲线；样品中ATP含量的分析：称取含有ATP的待测样品，加水溶解或稀释，并加入Tris‑HCl缓冲液；在搅拌下将BUIPTP检测底液滴加到上述溶液中；在最佳波长处测定二级散射光谱强度。利用本发明所提供的检测方法检测的ATP的浓度，与客观浓度的偏差小于2.5％，本发明所提出的检测方法具有很高的精准度；在ATP的浓度低至0.75nmol·L^‑1时本发明仍能检出，在2.5‑500nmol·L^‑1范围内具有良好的检测效果。

主权项

1.一种双核铀酰配合物在ATP分析中的应用，其特征在于，所述双核铀酰配合物为BUIPTP，该应用包括以下步骤：步骤1，确定检测ATP的最优条件：1‑1，在比色管中加入已知浓度的ATP溶液得到待测ATP溶液；1‑2，配制BUIPTP检测底液；1‑3，配制标准品溶液：在搅拌下将BUIPTP检测底液滴加到待测ATP溶液中，得到ATP标准溶液；1‑4，用荧光分光光度计测定不同激发波长下ATP标准溶液二级散射光谱强度，确定检测ATP的最佳波长；1‑5，配制不同pH的缓冲溶液，将不同pH的缓冲溶液加入ATP标准溶液中，在最佳波长下测定体系二级散射光谱，确定检测ATP的最佳pH；1‑6，将ATP标准溶液孵育0‑50min，在最佳波长及pH条件下测定二级散射光谱，确定检测ATP的最佳孵育时间；1‑7，在最优条件下，检测不同浓度的ATP的二级散射光谱；步骤2，绘制测定ATP的标准曲线：以ATP的浓度为横坐标，以二级散射光强度为纵坐标绘制测定ATP的标准曲线；步骤3，样品中ATP含量的分析：3‑1，称取含有ATP的待测样品，加水溶解或稀释，并加入缓冲液以达到最佳pH，得到待测样品溶液；3‑2，在搅拌下将BUIPTP检测底液滴加到待测样品溶液中，得到标准品溶液，孵育0‑50min；3‑3，在最佳波长处测定孵育后的标准品溶液的二级散射光谱强度；3‑4，从标准曲线中查找出所述样品中的ATP浓度，并计算出样品中的ATP含量。