[发明专利]一种一步法同时检测miR-486、miR-146b和miR-15b的方法及其应用

摘要

本发明公开了一种miR‑486、miR‑146b和miR‑15b探针设计方法，所述具体方法步骤如下：步骤一：设计茎环‑miR‑486序列为SH‑(CH2)6‑AAA AAC TCG GGG CAG CTC AGT ACA GGA TTT TT‑6‑FAM。本发明通过设计三种茎环结构3′端修饰了不同荧光分子，FAM修饰茎环‑miR‑486，Cy5修饰茎环‑miR‑146b，Cy3修饰茎环‑miR‑15b，5′端通过金‑巯键修饰到金纳米表面，由于茎环的特殊结构，荧光分子将与金纳米表面接触，荧光猝灭，当目标miRNA存在，由于碱基互补配对，打开茎环结构，使得荧光信号分子远离金纳米表面，从而可检测到相应荧光信号大大增加，实现了对转录因子三种miRNA的快速同时检测，具有良好的灵敏度和特异性。

主权项

1.一种miR‑486、miR‑146b和miR‑15b探针设计方法，其特征在于：所述具体方法步骤如下：步骤一：设计茎环‑miR‑486序列为SH‑(CH2)6‑AAA AAC TCG GGG CAG CTC AGT ACA GGA TTT TT‑6‑FAM，茎环‑miR‑146b序列为SH‑(CH2)6‑AAA AAC AGC CTA TGG AAT TCA GTT CTC ATT TTT‑Cy5，茎环‑miR‑15b序列为SH‑(CH2)6‑AAA AAT GTA AAC CAT GAT GTG CTG CTA TTT TT‑Cy3；步骤二：步骤一中的三种茎环结构3′端修饰了不同荧光分子，FAM修饰茎环‑miR‑486，Cy5修饰茎环‑miR‑146b，Cy3修饰茎环‑miR‑15b，5′端通过金‑巯键修饰到金纳米表面。