[发明专利]携带 SCC/BST2 突变抗原基因的重组腺相关病毒载体及其构建方法与应用在审
申请号: | 201810595990.6 | 申请日: | 2018-06-11 |
公开(公告)号: | CN108841867A | 公开(公告)日: | 2018-11-20 |
发明(设计)人: | 高倩;刘未辰;卢敬;杨曼;冯力 | 申请(专利权)人: | 北京安斯晨睿生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/864 | 分类号: | C12N15/864;A61K39/00;A61P35/00 |
代理公司: | 广州胜沃园专利代理有限公司 44416 | 代理人: | 黄健仪 |
地址: | 100000 北京市朝*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明提供了一种携带SCC/BST2突变抗原基因的重组腺相关病毒载体及其构建方法与应用,将BST2基因插入只保留LTR包装序列的重组腺相关病毒载体中。利用点突变技术突变63和91位半胱氨酸,153和154位酪氨酸突变成丙氨酸。该载体携带SCC/BST2 C63A C91A Y153A Y154A突变基因进入单核‑树突细胞系中,被用于刺激免疫系统的效应T细胞。实验证明,被这种腺相关病毒感染的树突细胞所诱导的效应T细胞在体外和患者体内均可有效抑制表达SCC/BST2基因的癌细胞,且无致瘤性。本发明的重组腺相关病毒载体及其衍生产品可用来制备细胞药物,治疗表达SCC/BST2基因的癌症。 | ||
搜索关键词: | 重组腺相关病毒载体 基因 效应T细胞 突变抗原 构建 携带 突变成丙氨酸 腺相关病毒 半胱氨酸 包装序列 基因插入 免疫系统 树突细胞 突变基因 细胞药物 衍生产品 有效抑制 点突变 酪氨酸 致瘤性 癌细胞 单核 可用 树突 体外 制备 突变 应用 诱导 癌症 体内 刺激 感染 保留 治疗 | ||
【主权项】:
1.一种携带SCC/BST2突变抗原基因的重组腺相关病毒载体,切除腺相关病毒基因中病毒包装识别位点内全部基因,插入SCC/BST2基因,定点突变,替换CMV启动子,得到pAAV/SCC/BST2 C63A C91A Y153A Y154A突变的重组腺相关病毒载体;其中,突变位点是63位、91位的半胱氨酸和153位、154位酪氨酸,四个位点均突变为丙氨酸;所述病毒包装识别位点为Rep和Cap致病基因,替换CMV启动子的启动子为β‑肌动蛋白启动子、SV40早期启动子和p5启动子中的一种。
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