[发明专利]耐药基因mcr-4/5/8荧光定量PCR检测方法有效

专利信息
申请号: 201810596675.5 申请日: 2018-06-11
公开(公告)号: CN108754000B 公开(公告)日: 2021-08-06
发明(设计)人: 王少林;史晓敏;李一鸣;刘园园 申请(专利权)人: 中国农业大学
主分类号: C12Q1/689 分类号: C12Q1/689;C12Q1/686;C12Q1/10;C12N15/11;C12R1/19
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摘要: 发明公开了一种耐药基因mcr‑4/5/8荧光定量PCR检测方法。本发明保护引物组合,由序列表的序列1至序列6所示的单链DNA组成。本发明建立的一种针对这三种mcr基因的基于SYBR染料的荧光定量PCR方法。该检测方法具有快速,灵敏度高,特异性强的技术优点,适用于临床和畜牧养殖业多黏菌素耐药基因mcr‑4/5/8流行状况的监测。
搜索关键词: 耐药 基因 mcr 荧光 定量 pcr 检测 方法
【主权项】:
1.引物组合甲,由引物对Ⅰ、引物对Ⅱ和引物对Ⅲ组成;所述引物对Ⅰ由引物F1和引物R1组成;所述引物F1为如下(a1)或(a2):(a1)序列表的序列1所示的单链DNA分子;(a2)将序列1经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列1具有相同功能的DNA分子;所述R1为如下(a3)或(a4):(a3)序列表的序列2所示的单链DNA分子;(a4)将序列2经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列2具有相同功能的DNA分子;所述引物对Ⅱ由引物F2和引物R2组成;所述引物F2为如下(b1)或(b2):(b1)序列表的序列3所示的单链DNA分子;(b2)将序列3经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列3具有相同功能的DNA分子;所述引物R2为如下(b3)或(b4):(b3)序列表的序列4所示的单链DNA分子;(b4)将序列4经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列4具有相同功能的DNA分子;所述引物对Ⅲ由引物F3和引物R3组成;所述引物F3为如下(c1)或(c2):(c1)序列表的序列5所示的单链DNA分子;(c2)将序列5经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列5具有相同功能的DNA分子;所述引物R3为如下(c3)或(c4):(c3)序列表的序列6所示的单链DNA分子;(c4)将序列6经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列6具有相同功能的DNA分子。
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