[发明专利]绵羊肺炎支原体和丝状支原体山羊亚种双重荧光定量方法

摘要

本发明提供一种绵羊肺炎支原体和丝状支原体山羊亚种双重荧光定量PCR方法，分别设计一对针对绵羊肺炎支原体特异性检测引物Mo‑F、Mo‑R及一条荧光探针Mo‑P，一条针对丝状支原体山羊亚种的特异性检测引物Mmc‑F、Mmc‑R及一条荧光探针Mmc‑P，并确定了针对绵羊肺炎支原体和丝状支原体山羊亚种的双重应荧光定量PCR方法的特异性引物及应荧光探针的浓度。本发明提供的双重荧光定量PCR方法可以同时检测和鉴别绵羊肺炎支原体和丝状支原体山羊亚种两种支原体，具有快速、准确、特异性强、重复性好等优点，同时还可节约成本，适用于对以上两种支原体所引起的羊支原体性肺炎的快速检测和流行病学调查提供有效手段。

主权项

1.一种绵羊肺炎支原体和丝状支原体山羊亚种双重荧光定量PCR引物和探针，其特征在于，检测绵羊肺炎支原体的特异性引物及探针的序列分别为：上游引物Mo‑F: 5’‑ CTTCGGGACTTATTGGAG‑3’；下游引物Mo‑R: 5’‑GATGCAAACTGATTTACTTG‑3’；荧光探针Mo‑P: 5’‑FAM‑ AAGACCGATTGTCAGGCCGA –Eclipse‑3’；检测丝状支原体山羊亚种的特异性引物及探针的序列分别为：上游引物Mmc‑F: 5’‑ CTAGCTAGCATAGTTGTTG‑3’；下游引物Mmc‑R: 5’‑ GCTTGAACAACTATATTGTA ‑3’；荧光探针Mmc‑P: 5’‑TET‑ TAACACAGTTAAAGCAGACCCACCA–BHQ‑3’。