[发明专利]一种用于生产AFG1的培养基及其制备AFG1标准品的方法

摘要

本发明提出了一种用于生产AFG1的培养基及其制备AFG1标准品的方法，包括一级PDA液体培养基和二级培养基；本发明通过变温培养提高了次级代谢产物真菌毒素的产量；原料易得，生产成本低，工艺操作更安全；通过密封袋的引入，模拟了自然微氧潮湿条件，提高了毒素的转化率，减少了转接过程污染风险；提取方法简单；溶剂回收利用成本迪；通过氮气吹干AFG1结晶，加己烷重结晶纯度提高到99％以上。

主权项

1.一种用于生产AFG1的培养基，其特征在于，包括一级PDA液体培养基和二级培养基；其中，所述一级PDA液体培养基的制备包括如下步骤：将土豆削皮切丁，每195g‑205g土豆加入495‑505mL的水，煮沸30min；双层纱布过滤至烧杯中，加入15‑25g蔗糖，加水至1L，每50mL溶液分装入250mL三角瓶，121℃高压灭菌20min；所述二级培养基的成份按照重量份包括：玉米粉975‑985g，鸡蛋175‑185g，酵母粉10‑20g，蛋白胨30‑40g，蔗糖180‑190g，玉米浆575‑585g，氯化钠3‑7g，花生饼粉75‑85g，水575‑585g；所述二级培养基的制备包括如下步骤：S1、成分一的制备：将975‑985g玉米粉、175‑185g鸡蛋、5‑10g蔗糖和10‑20g酵母粉加水搅拌均匀，室温静置2小时，分装入5个500mL烧杯中，用8层纱布包扎；S2、成分二的制备：将30‑40g蛋白胨，175‑180g蔗糖，575‑585g玉米浆，3‑7g氯化钠，75‑85g花生饼粉搅拌均匀，再加适量水搅成馅状，分装入5个500mL烧杯中，用8层纱布包扎；成分一和成分二在121℃高压灭菌25min；S3、灭菌结束后，在灭菌温度降低到80℃时，直接转移至超净工作台，将成分一和成分二进行一一对应，放入研磨仪打碎，搅匀后重新转移至烧杯中。