[发明专利]Sqstm1全基因敲除小鼠动物模型的构建方法和应用在审
| 申请号： | 201810609211.3 | 申请日： | 2018-06-13 |
| 公开（公告）号： | CN108753783A | 公开（公告）日： | 2018-11-06 |
| 发明（设计）人： | 李冬;吴军录;孙祖俊;权文强 | 申请（专利权）人： | 上海市同济医院 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/90;A01K67/027 |
| 代理公司： | 上海卓阳知识产权代理事务所(普通合伙) 31262 | 代理人： | 周春洪 |
| 地址： | 200065 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 发明公开了一种Sqstm1全基因敲除小鼠动物模型的构建方法和应用，所述小鼠动物模型是敲除Sqstm1基因的小鼠。本发明基于CRISPR/Cas9基因敲除技术构建Sqstm1基因敲除小鼠模型，其构建方法包括如下步骤：步骤一、设计sgRNA和Cas9 RNA并体外转录成mRNA，将有活性的sgRNA和Cas9 RNA显微注射入小鼠受精卵中，获得Sqstm1基因敲除小鼠；步骤二、对Sqstm1基因敲除小鼠动物模型的鉴定。本发明基于CRISPR/Cas9基因敲除技术首次构建了Sqstm1基因敲除的小鼠动物模型，为研究Sqstm1与自噬、肿瘤等疾病的关系提供便捷、可靠、经济的动物模型。 | ||
| 搜索关键词： | 动物模型 构建 基因敲除小鼠 基因敲除 小鼠 敲除小鼠 全基因 小鼠受精卵 关系提供 技术构建 显微注射 应用发明 转录 并体 敲除 肿瘤 基因 疾病 应用 研究 | ||
【主权项】：
1.一种建立Sqstm1基因敲除小鼠模型的方法，基于CRISPR/Cas9基因敲除技术建立Sqstm1基因敲除小鼠模型，其特征在于，所述方法包括如下步骤：步骤一、确定Sqstm1小鼠待敲除基因的特异性靶位点sgRNA1，sgRNA2，sgRNA3，sgRNA4，并与Cas9核酸酶体外转录成mRNA；步骤二、将有活性的sgRNA和Cas9RNA显微注射入小鼠受精卵中，获得Sqstm1基因敲除小鼠；所述RNA1如SEQ ID NO:2所示，所述sgRNA 2如SEQ ID NO:3所示，所述sgRNA3如SEQ ID NO:4所示，所述sgRNA4如SEQ ID NO:5所示。
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