[发明专利]一种亮氨酸氨肽酶3抑制剂的抑酶活性测定方法及应用在审
| 申请号： | 201810628630.1 | 申请日： | 2018-06-19 |
| 公开（公告）号： | CN108753914A | 公开（公告）日： | 2018-11-06 |
| 发明（设计）人： | 王学健;杨翰林;季胜萍;武慧娜;房春燕 | 申请（专利权）人： | 潍坊医学院 |
| 主分类号： | C12Q1/37 | 分类号： | C12Q1/37;C12Q1/02;C12N15/867 |
| 代理公司： | 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 | 代理人： | 王志坤 |
| 地址： | 261053 *** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明提供一种测定化合物对亮氨酸氨肽酶3活性抑制率的方法，以表达人源LAP3的K562‑LAP3细胞株作为酶源进行化合物抑酶活性测定。本发明还提供一种能够测定化合物对亮氨酸氨肽酶3活性抑制率的试剂盒，该试剂盒采用上述方法进行测定。本发明技术方案采用人源的LAP3作为酶源进行化合物抑制活性效果评价，准确率高于现有技术中采用猪源亮氨酸氨肽酶的检测方法，且成本更为经济，结果更准确。 | ||
| 搜索关键词： | 亮氨酸氨肽酶 酶活性测定 活性抑制 试剂盒 酶源 人源 效果评价 细胞株 抑制剂 准确率 猪源 检测 应用 | ||
【主权项】：
1.一种测定化合物亮氨酸氨肽酶3活性抑制率的方法，特征在于，以表达人源LAP3的K562‑LAP3细胞株作为酶源进行化合物抑酶活性测定，步骤如下：(1)将PBS清洗后的K562‑LAP3细胞接种于96孔板中；(2)向孔中加入不同浓度梯度的化合物；(3)化合物作用一段时间后加入LAP3底物培养；(4)测定405nm处的吸光度值，计算抑制率：![]()
加药组平均OD值＝过表达加药组平均OD值‑未过表达加药组平均OD值不加药组平均OD值＝过表达组平均OD值‑未过表达组平均OD值。
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