[发明专利]大肠杆菌O157的多重PCR检测引物及检测方法在审
申请号: | 201810641312.9 | 申请日: | 2018-06-21 |
公开(公告)号: | CN108950029A | 公开(公告)日: | 2018-12-07 |
发明(设计)人: | 颜世敢;朱丽萍 | 申请(专利权)人: | 齐鲁工业大学 |
主分类号: | C12Q1/689 | 分类号: | C12Q1/689;C12Q1/686;C12Q1/10;C12R1/19 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 250353 山东省济南*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明涉及大肠杆菌O157的多重PCR检测引物及检测方法。多重PCR检测引物包括3对引物,分别扩增O157的rfbE、fliC、stx1基因,序列详见序列表所示。使用上述检测引物对大肠杆菌O157DNA进行多重PCR检测,设置阳性对照和阴性对照、空白对照,所述PCR扩增条件为94℃变性5min,然后94℃预变性30s,48‑52℃退火45s,72℃延长45s,共扩增循环30‑35个循环,最后72℃延伸5min。本发明的大肠杆菌O157检测引物、检测方法具有特异、灵敏的优点,可以实现对大肠杆菌O157的精准鉴定。 | ||
搜索关键词: | 大肠杆菌O157 多重PCR检测 引物 检测引物 检测 大肠杆菌 退火 空白对照 扩增循环 阳性对照 阴性对照 对引物 预变性 变性 扩增 灵敏 延伸 | ||
【主权项】:
1.大肠杆菌O157的多重PCR检测引物及检测方法,其特征在于包括3对引物,引物序列如下:rfbE上游引物F1:5’‑CGTAAGAGGGACCGTAGA‑3’(SEQ ID No.1),rfbE下游引物F2:5’‑TGGCTGGATTATCGTTTG‑3’(SEQ ID No.2),fliC上游引物F3:5’‑GCTGTCGAGTTCTATCGAG‑3’(SEQ ID No.3),fliC下游引物F4:5’‑GTGACTTTATCGCCATTCC‑3’(SEQ ID No.4),stx1上游引物F5:5’‑ACGAGGGCTTGATGTCTA‑3’(SEQ ID No.5),stx1下游引物F6:5’‑GTAAGGCTTCTGCTGTGA‑3’(SEQ ID No.6)。
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