[发明专利]山茱萸提取莫诺苷、马钱苷和熊果酸的方法

摘要

本发明涉及一种山茱萸提取熊果酸、马钱苷和莫诺苷的方法，将山茱萸果实干燥粉碎，醇提，过滤，真空或减压浓缩，过滤得滤液，滤渣经枯草芽孢杆菌发酵，醇提，过滤得合并滤液，上AB‑8大孔树脂柱，得莫诺苷纯品；将滤渣和滤渣甲醇溶解，上硅胶柱分别获得熊果酸、马钱苷，结晶重结晶一次得纯品。

主权项

1.一种从山茱萸中提取莫诺苷、马钱苷和熊果酸的方法，包括如下步骤：(1)将山茱萸果实进行干燥并粉碎，加入60～85％乙醇水溶液进行室温提取1～3h，过滤得滤液Ⅰ和滤渣Ⅰ，其中加入60～85％乙醇水溶液体积L与山茱萸干重比为2～5：1；(2)滤液Ⅰ在40℃～55℃下进行真空或减压浓缩至原有体积的1/10～1/25，过滤一次得滤液Ⅱ和滤渣Ⅱ；(3)向滤渣Ⅰ中加入少量的水，再接种10～15％的枯草芽孢杆菌，进行30℃～35℃发酵24～36h，得发酵物，其中加入水体积L与山茱萸干重比为3～10：50；(4)将发酵物加入乙醇进行室温提取1～3h，过滤得滤液Ⅲ和滤渣Ⅲ，其中加入乙醇体积L与酶解液体积L比为3～6：1，其中乙醇为95％以上的乙醇或无水乙醇；(5)滤液Ⅲ在40℃～55℃下进行真空或减压浓缩至原有体积的1/15～1/30，陶瓷膜过滤一次得滤液Ⅳ和滤渣Ⅳ；(6)将滤液Ⅱ和滤液Ⅳ合并后上AB‐8大孔树脂柱进行吸附，用四倍至六倍柱体积的20～40％乙醇水溶液进行洗脱，收集洗脱液Ⅰ；(7)将洗脱液Ⅰ进行40℃～55℃下进行真空或减压浓缩至干燥物A，得莫诺苷纯品；(8)将滤渣Ⅱ和滤渣Ⅳ加入无水甲醇溶解，上硅胶柱进行吸附，用三倍至五倍柱体积的甲醇水溶液进行柱洗脱，得到洗脱液Ⅱ，最后三倍至五倍柱体积氯仿‐甲醇溶液进行柱洗脱，得到洗脱液Ⅲ，洗脱液Ⅱ和洗脱液Ⅲ在50℃～65℃下进行真空或减压浓缩至干，分别获得干燥物B、干燥物C；(9)干燥物B加入乙醇溶液在40～45℃下保温15～30min，趁热陶瓷膜过滤1次，滤液放置冰箱中过夜，结晶重结晶一次得熊果酸纯品；(10)干燥物C加入丙酮在35～40℃下保温15～30min，趁热陶瓷膜过滤1次，滤液放置冰箱中过夜，结晶重结晶一次，得马钱苷纯品。