[发明专利]一种溶菌酶分子印迹温度敏感性水凝胶的制备方法有效
| 申请号： | 201810654479.9 | 申请日： | 2018-06-22 |
| 公开（公告）号： | CN108752524B | 公开（公告）日： | 2021-06-04 |
| 发明（设计）人： | 高博;张煜星;宋文琦;杨宏伟;康小希;徐向阳 | 申请（专利权）人： | 西京学院 |
| 主分类号： | C08F220/54 | 分类号： | C08F220/54;C08F226/06;C08F222/38;C08J9/26;B01J20/26;B01J20/30 |
| 代理公司： | 北京众合诚成知识产权代理有限公司 11246 | 代理人： | 夏艳 |
| 地址： | 710100 *** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种溶菌酶分子印迹温度敏感性水凝胶的制备方法，以氯化1‑羧甲基‑3‑乙烯基咪唑离子液体作为功能单体、N‑异丙基丙烯酰胺(NIPAm)作为支撑单体，N、N‑亚甲基双丙烯酰胺(BIS)作为交联剂，过硫酸铵(APS)和四甲基乙二胺(TEMED)作为氧化还原引发剂，三羟甲基氨基甲烷与盐酸(Tris‑HCl)的缓冲溶液(pH＝7，10mM，25℃)为溶剂，溶菌酶(Lyz)作为印迹分子的分子印迹温度敏感性水凝胶的制备方法，获得的水凝胶对Lyz均具有较高的印迹效率和良好的识别效果。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 溶菌酶 分子 印迹 温度 敏感性 凝胶 制备 方法 | ||
【主权项】：
1.一种溶菌酶分子印迹温度敏感性水凝胶的制备方法，其特征在于，包括以下操作：1)按照的1～5：100：100质量比，将功能单体氯化1‑羧甲基‑3‑乙烯基咪唑、支撑单体N‑异丙基丙烯酰胺和印迹分子溶菌酶溶解在pH＝7的Tris‑HCl缓冲溶液中得到预聚体系；所述的Tris‑HCl缓冲溶液与N‑异丙基丙烯酰胺质量比为10：1；2)向所得的预聚体系中加入交联剂N,N‑亚甲基双丙烯酰胺，其加入量为N‑异丙基丙烯酰胺质量的1～5％；然后加入引发剂过硫酸铵，其加入量为N‑异丙基丙烯酰胺质量的1～2％，充分混合得到反应混合溶液；3)将反应混合溶液在25～30℃下超声除氧20～30min后，通入氮气30～50min，然后迅速加入四甲基乙二胺，密封；四甲基乙二胺加入量为N‑异丙基丙烯酰胺质量的1～2％。4)25～30℃下反应3～6h，制得温度敏感性水凝胶；5)将得到的温度敏感性水凝胶进行洗脱：将温度敏感性水凝胶放入到Tris‑HCl缓冲溶液中25～30℃下洗脱24～48h，随后再放入到去离子水中浸泡24h，取出后在40～50℃下真空干燥12～24h，得到溶菌酶分子印迹温度敏感性水凝胶。
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