[发明专利]重组PRESCISSION酶在大肠杆菌中的生产方法在审
| 申请号： | 201810708482.4 | 申请日： | 2018-07-02 |
| 公开（公告）号： | CN108795964A | 公开（公告）日： | 2018-11-13 |
| 发明（设计）人： | 雍金贵;杜攀;李森 | 申请（专利权）人： | 通用生物系统（安徽）有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N9/50 |
| 代理公司： | 北京轻创知识产权代理有限公司 11212 | 代理人： | 沈尚林 |
| 地址： | 239000 安徽*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 本发明公开了重组PRESCISSION酶在大肠杆菌中的生产方法，包括以下步骤：S1、PGEX‑4T‑1‑PRESCISSION蛋白酶表达质粒的构建；S2、PRESCISSION蛋白酶的诱导表达与鉴定；S3、PRESCISSION蛋白酶的纯化与鉴定。本发明应用大肠杆菌表达系统，通过设计表达载体，实现重组PRESCISSION蛋白酶在大肠杆菌中表达，再经过亲和层析、Superdex 75凝胶过滤层析等方法对目标蛋白酶进行提纯，大幅缩短了目标蛋白酶的纯化流程与纯化时间，同时提高了蛋白酶的纯度、得率和酶活，节省实验步骤并减少成本。本发明方法，为研发及生产其他蛋白类工具酶奠定了基础。 | ||
| 搜索关键词： | 蛋白酶 大肠杆菌 目标蛋白酶 大肠杆菌表达系统 蛋白酶表达质粒 凝胶过滤层析 表达载体 亲和层析 实验步骤 诱导表达 工具酶 提纯 得率 构建 酶活 研发 生产 蛋白 应用 | ||
【主权项】：
1.重组PRESCISSION酶在大肠杆菌中的生产方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、PGEX‑4T‑1‑PRESCISSION蛋白酶表达质粒的构建；S2、PRESCISSION蛋白酶的诱导表达与鉴定；S3、PRESCISSION蛋白酶的纯化与鉴定。
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