[发明专利]无刺花椒组织培养初代诱导的方法

摘要

本发明涉及无刺花椒组织培养初代诱导的方法，包括取外植体，外植体消毒，接种和诱导培养，通过优化取外植体、消毒处理、接种方式及诱导培养基，该方法有效抑制了无刺花椒外植体的内生菌产生，建立了无刺花椒组织培养初代诱导技术体系，对无刺花椒的种苗繁殖具有重要意义。

主权项

1.无刺花椒组织培养初代诱导的方法，其特征在于，包括如下步骤：取外植体，外植体消毒，接种和诱导培养；所述外植体消毒为将枝条剪成带2‑3个芽的小段并去掉浸泡到水中变黑的组织，选取靠近顶芽的2‑3处茎段作为培养材料；消毒前加入3‑5滴吐温‑80，再加入体积分数2%的次氯酸钠溶液消毒，盖住盖子后持续振荡消毒3‑4min，无菌水清洗4‑5次后置于消毒好的接种盘备用；所述接种为采用将茎段的上端插入到培养基中，腋芽浸没于培养基，茎段下端暴露在培养基表面外，培养基配方为添加 0 mg/L 6‑BA、0.1mg/L NAA、2.0mg/L ZT、0.1 mg/L植物抑菌剂、6g/L卡拉胶和30 g/L蔗糖的MS培养基；所述诱导培养为接种后置于光照培养室暗培养3d后，开灯光照培养为12 h /d，培养温度为25±2℃，7‑10d后，筛除真菌、细菌污染及褐化，对无污染、无褐化进行转代培养，将茎段的下端插入到培养基中，更换培养基至出芽。