[发明专利]一种检测CYP3A4、CYP3A5多态性位点的试剂盒及其方法

摘要

本发明公开了一种检测CYP3A4、CYP3A5多态性位点的试剂盒及其方法，包含序列表中序列1‑4所示CYP3A4*1G的特异性上下游引物序列、序列5‑8所示CYP3A4*1G的特异性TaqMan‑MGB双荧光探针序列、序列9‑12所示CYP3A5*3的特异性上下游引物序列和序列13‑16所示CYP3A5*3的特异性TaqMan‑MGB双荧光探针序列。本发明的有益效果为特异性强、防污染、灵敏度高、检测速度快、结果分析简单且准确性高、该试剂盒可以通过检测CYP3A4、CYP3A5基因多态性位点，判断待测对象对芬太尼类药物的代谢能力，从而更准确有效地指导芬太尼类等药物的用药，具有实际的临床应用价值。将该试剂盒应用于临床的诊断后，与现有技术的吻合度更高，且价格低廉、可重复性高。

主权项

1.一种检测CYP3A4、CYP3A5多态性位点的试剂盒，该试剂盒包括引物，特异性TaqMan双荧光探针和PCR扩增试剂，其中检测试剂盒分成两组：A组用于检测位点CYP3A4*1G的引物序列：SEQ1：5'CAGAGCCTTCCTACATAGAG 3'；SEQ2：5'GGCCCAATCAATTATCTTTA 3'；用于检测位点CYP3A4*1G的探针序列：SEQ3：5'FAM‑TCTCCATGTACCATCCACTC‑3'MGB；SEQ4：5'VIC‑TCTCCATGTATCATCCACTC‑3'MGB；用于检测位点CYP3A5*3的引物序列：SEQ5：5'AGAGTGGCATAGGAGATACC 3'；SEQ6：5'GTGTGACACACAGCAAGAGT 3'；用于检测位点CYP3A5*3的探针序列：SEQ7：5'FAM‑TTGTCTTTCAATATCTCTTCCC‑3'MGB；SEQ8：5'VIC‑TTGTCTTTCAGTATCTCTTCCC‑3'MGB；B组用于检测位点CYP3A4*1G的引物序列：SEQ9：5'CTTACGCTTCTGCCAGTAG 3'；SEQ10：5'TATGTATGAACTGGCCACTC 3'；用于检测位点CYP3A4*1G的探针序列：SEQ11：5'FAM‑CTCCATGTACCATCCACT‑3'MGB；SEQ12：5'VIC‑CTCCATGTATCATCCACT‑3'MGB；用于检测位点CYP3A5*3的引物序列：SEQ13：5'GAGAGTGGCATAGGAGATAC 3'；SEQ14：5'AAGCCAGACTTTGATCATTA 3'；用于检测位点CYP3A5*3的探针序列：SEQ15：5'FAM‑TGTCTTTCAATATCTCTTCCC‑3'MGB；SEQ16：5'VIC‑TGTCTTTCAGTATCTCTTCCC‑3'MGB；所述特异性TaqMan双荧光探针分为特异性野生型TaqMan荧光探针和特异性突变型TaqMan荧光探针，其5’端连接有荧光报告基团，3’端连接有淬灭基团；所述特异性野生型TaqMan荧光探针和所述特异性突变型TaqMan荧光探针的荧光报告基团肯定是不同的，淬灭基团可相同可不同；所述荧光报告基团可选自下组的报告基团：FAM、VIC、TET、JOE、HEX；所述淬灭基团可选自下组的淬灭基团：BHQ1、BHQ2、TAMRA、MGB；所述特异性野生型TaqMan荧光探针的荧光报告基团为FAM，淬灭基团为MGB；所述特异性突变型TaqMan荧光探针的荧光报告基团为VIC，淬灭基团为MGB。