[发明专利]一种高效的酿酒酵母无痕基因敲除方法及其应用有效

专利信息
申请号: 201810748064.8 申请日: 2018-07-10
公开(公告)号: CN109136254B 公开(公告)日: 2021-06-04
发明(设计)人: 张翠英;肖冬光;李凭;王建辉;郭学武;陈叶福;董健;杜丽平;马立娟;于爱群 申请(专利权)人: 天津科技大学
主分类号: C12N15/81 分类号: C12N15/81;C12N1/19;C12R1/865
代理公司: 天津盛理知识产权代理有限公司 12209 代理人: 赵瑶瑶
地址: 300457 天津市滨*** 国省代码: 天津;12
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摘要: 发明公布了一种在酿酒酵母中高效无痕敲除的方法,并通过对该无痕基因敲除系统中的正向同源序列、半乳糖浓度及半乳糖诱导时间进行优化,第二步同源重组的概率达到6.86×10‑4。以酿酒酵母AY15的单倍体α5为出发菌株,BAT2基因为靶基因,实现对野生酿酒酵母菌株基因BAT2高效的无痕敲除,通过白酒发酵实验,改造菌株的正丙醇、异丁醇和异戊醇含量亲本菌株相比分别降低了20.32%、47.85%和23.14%,达到了低产高级醇的目的。该方法可广泛应用于酵母及其他微生物的基因改造,由于所获得的突变株不残留任何外源基因,可以安全的用于工业生产,为直接在工业菌株中进行基因敲除提供了有益的参考。
搜索关键词: 一种 高效 酿酒 酵母 基因 方法 及其 应用
【主权项】:
1.一种高效的酿酒酵母无痕基因敲除方法,其特征在于:以酿酒酵母AY15的单倍体α5为出发菌株,BAT2基因为靶基因,实现对基因BAT2的无痕敲除。
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