[发明专利]一种大规模生产蜕膜间充质干细胞活性因子的方法及其应用在审
| 申请号： | 201810755054.7 | 申请日： | 2018-07-11 |
| 公开（公告）号： | CN109097391A | 公开（公告）日： | 2018-12-28 |
| 发明（设计）人： | 刘云城;曾桂芳;梁晓;彭浩;陈康卓;刘沐芸;胡祥 | 申请（专利权）人： | 个体化细胞治疗技术国家地方联合工程实验室（深圳）;深圳科诺医学检验实验室 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12P21/02;C12N5/10;C07K14/52 |
| 代理公司： | 南京正联知识产权代理有限公司 32243 | 代理人： | 卢霞 |
| 地址： | 518000 广东省深圳市南山区粤*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种大规模生产蜕膜间充质干细胞活性因子的方法，包括分离提取健康人蜕膜间充质干细胞；经基因工程改造后进行悬浮驯化，通过生物反应器悬浮扩大培养，收集大量上清液；通过特有低温真空冻干技术制成蜕膜间充质干细胞活性因子。本发明的有益效果是：基于基因工程手段改造蜕膜间充质干细胞并进行悬浮驯化获得悬浮细胞株，此细胞株能够分泌更高水平的活性因子，并且能够通过生物反应器大规模生产，大大降低生产成本。并且此方法通过特殊的低温真空冻干技术，获得活性因子纯度、稳定性更高。通过此方法生产的蜕膜间充质干细胞活性因子在具有生物学活性功能的产品，如化妆品或保健品中应用，具有更高的社会及经济效益。 | ||
| 搜索关键词： | 间充质干细胞 活性因子 蜕膜 悬浮 生物反应器 低温真空 驯化 冻干 生物学活性功能 基因工程改造 基因工程手段 分离提取 扩大培养 悬浮细胞 上清液 细胞株 分泌 保健品 化妆品 应用 改造 健康 生产 | ||
【主权项】：
1.一种大规模生产蜕膜间充质干细胞活性因子的方法，其特征在于，包括以下步骤：a)分离提取健康人蜕膜间充质干细胞；b)经基因工程改造后进行悬浮驯化，通过生物反应器悬浮扩大培养，收集大量上清液；c)通过低温真空冻干技术制成蜕膜间充质干细胞活性因子；所述的步骤b)中，悬浮驯化方法如下：通过h‑siat7e真核表达载体转染蜕膜间充质干细胞，通过无血清悬浮培养培养基不断进行贴壁‑悬浮间隔培养筛选出悬浮蜕膜间充质干细胞细胞株，命名为Siat7e‑DPMSC，进而通过生物反应器扩大培养，收集培养上清。
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