[发明专利]一种分离纯化柑橘多甲氧基黄酮的方法

摘要

本发明属于化合物提取及纯化技术领域，具体涉及一种分离纯化柑橘多甲氧基黄酮的方法。本发明采用大孔吸附树脂与制备型高效液相色谱联用的方法分离纯化出多个多甲氧基黄酮单体，包括粗提、大孔吸附树脂富集除杂和制备型高效液相色谱纯化得单体的过程。本发明的方法提取的杂质大大减少，目标成分含量增加，分离纯化效率较高，能同时分离纯化出5个PMFs单体且单体纯度95％以上，使用的溶剂安全无毒副作用且能有效回收。

主权项

1.一种分离纯化柑橘多甲氧基黄酮的方法，其特征在于，采用大孔吸附树脂与制备型高效液相色谱联用的方法分离纯化出多个多甲氧基黄酮单体，包括以下步骤：1)提取柑橘皮渣与85％‑95％(v/v)乙醇水溶液混匀，于45℃以下辅助以超声处理提取30min‑2h，取上清，浓缩得粗提液；2)富集除杂预处理好的HPD300大孔树脂装入层析柱，将所述粗提液泵入所述层析柱，3％‑10％(v/v)乙醇水溶液泵入所述层析柱水洗除杂，90％‑95％(v/v)乙醇水溶液泵入所述层析柱解除吸附，收集解除吸附阶段的洗脱液，浓缩并冻干，得PMF混合物；3)分离纯化用甲醇或乙醇溶解所述PMF混合物，获得待纯化溶液，通过质谱引导的制备型高效液相色谱进行进一步分离纯化，待纯化溶液上样后，采用流动相梯度洗脱，按保留时间收集各馏分，浓缩并冻干，获得多甲氧基黄酮单体；所述流动相由流动相A和流动相B组成，其中所述流动相A：体积分数为0.1％的甲酸的乙腈溶液；所述流动相B：体积分数为0.1％的甲酸的水溶液；梯度洗脱时，所述流动相中流动相A占比起始为15％‑20％；在40min‑50min内流动相A占比上升至55％‑70％的高点，过程中流动相A占比28％‑45％持续的时间为25min‑35min；所述流动相A占比上升至所述高点后，3min‑7min回落至15％‑20％。