[发明专利]一种高效表达利拉鲁肽前体的重组工程菌及其应用有效

专利信息
申请号: 201810787109.2 申请日: 2018-07-16
公开(公告)号: CN110724187B 公开(公告)日: 2022-09-16
发明(设计)人: 杨柏成;赵运星 申请(专利权)人: 甘李药业股份有限公司
主分类号: C07K14/605 分类号: C07K14/605;C12N15/16;C12N15/70;C12N1/21;C12P21/02;C12R1/19
代理公司: 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 代理人: 王文君;陈征
地址: 101102 北京市通州区中关村*** 国省代码: 北京;11
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摘要: 发明提供了一种高效表达利拉鲁肽前体的重组工程菌及其应用。本发明在利拉鲁肽前体分子Arg34G LP‑1(7‑37)的N端设计信号肽和肠激酶酶切位点与之紧邻,C端连接终止密码子,三者构成目的基因,然后插入到表达载体两个酶切位点之间,构建表达利拉鲁肽前体的重组工程菌,将工程菌进行高密度发酵培养,以融合蛋白的包涵体形式表达,重组融合蛋白表达量高,重组融合蛋白约占菌体总蛋白的25%‑35%,目的蛋白包涵体表达量达15‑20g/L。包涵体杂蛋白含量低,利于分离纯化,纯化效率高,且稳定性好,极大地降低了生产成本,提高了生产效率,在糖尿病治疗药物制备领域具有良好的应用前景。
搜索关键词: 一种 高效 表达 利拉鲁肽前体 重组 工程 及其 应用
【主权项】:
1.一种利拉鲁肽前体分子,其包括A-B-C的结构,其中A为信号肽,B为连接肽,C为Arg34GLP-1(7-37)的序列;所述信号肽选自MalE,PhoA,OmpF,PelB或是经替换、缺失和/或添加一个或几个氨基酸残基形成的与MalE,PhoA,OmpF,PelB具有同等功能的氨基酸序列;所述连接肽选自肠激酶、凝血酶、SUMO或Protease的酶切位点。/n
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