[发明专利]一种稻曲病人工接种方法

摘要

本发明公开了一种稻曲病人工接种方法，涉及微生物培养领域。本发明可稳定高效诱发不同品种水稻的稻曲病，接种穗发病率达到100％，病穗平均病粒数可达88.36粒。发病稻株可用于研究稻曲病的发病过程及水稻对稻曲病的抗感性评价，也可用于稻曲病防治药物的研发。

主权项

1.一种稻曲病人工接种方法，其特征在于，包含以下操作步骤：(1)采集新鲜稻曲球，采用组织培养法分离病菌，纯化后接种于PSA培养基斜面，28℃，黑暗培养48h；(2)取活化好的稻曲病菌PSA菌块3块转接到无菌的100mL PSB培养液中，28℃，150rpm黑暗恒温培养7d；从刚培养好的新鲜的稻曲病菌PSB培养液中吸取菌液0.5mL移入新鲜的PSB培养基中继续振荡培养；(3)28℃黑暗恒温振荡培养7～9d后，匀浆制成菌丝片段与分生孢子的混合液，以此作为接种液；(4)将水稻进行常规浸种、消毒和育苗后，移栽温室，进行常规栽培管理，栽培期间不施用农药；(5)在水稻孕穗期间于17:00至19:00进行穗苞注射接种，接种的部位为水稻穗苞中部，接种时采用5mL注射器，针头向下倾斜与穗苞成45°夹角，将接种液从侧面注射入穗苞，每个穗苞注射2.5～4mL；(6)水稻接种后展开温棚的遮阳网，并启动温棚的自动喷淋系统，具体设置为每个水泥池上方配备1个喷射面积达2m2的雾化喷头，每天喷淋9次，每隔4h喷淋一次，每次喷淋5min，其中12:00至16:00之间喷淋间隔时间设置为60min；(7)水稻人工注射接种稻曲病菌30d后，割下所有稻穗，统计接种穗发病率和病穗平均病粒数。