[发明专利]DNA双标记效率检测方法在审
申请号: | 201810807074.4 | 申请日: | 2018-07-21 |
公开(公告)号: | CN109136332A | 公开(公告)日: | 2019-01-04 |
发明(设计)人: | 侯森;明永飞;孙丽丽;戴洪萍;吕冰;侯兰梅 | 申请(专利权)人: | 山东华谱检测技术有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6816 | 分类号: | C12Q1/6816 |
代理公司: | 北京中索知识产权代理有限公司 11640 | 代理人: | 宋涛 |
地址: | 264003 山东省烟台市*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明提供了一种DNA双标记效率检测方法,包括:制作两份具有荧光标记的互补单链DNA溶液,记为溶液A和B;制作没有荧光标记的序列相同的两条互补单链DNA溶液,记为溶液C和D;调节溶液A~D,使单链DNA的浓度一致;将等体积的溶液A和B以及缓冲液混合退火处理,得到溶液一;将等体积的溶液A~D混合,进行退火处理,得到溶液二;将溶液一和溶液二分别通过预设的激光共聚焦荧光相关谱光路中进行探测计算,分别获取溶液一和溶液二的荧光分子处于三态的比例p1和p2,以及溶液一和溶液二的相关曲线的y轴截距G1(0)和G2(0),通过预置算法计算DNA双标记效率DDLE。借此,本发明可以更精确的计算DNA双标记效率。 | ||
搜索关键词: | 双标记 互补单链DNA 退火处理 效率检测 荧光标记 激光共聚焦 荧光相关谱 荧光分子 预置算法 单链DNA 缓冲液 光路 截距 三态 预设 制作 探测 | ||
【主权项】:
1.一种DNA双标记效率检测方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:制作两份具有荧光标记的互补单链DNA溶液,分别记为溶液A和溶液B;制作没有荧光标记的序列相同的两条互补单链DNA溶液,分别记为溶液C和溶液D;调节溶液A~D浓度,使单链DNA的浓度基本一致;将等体积的溶液A和B以及预定体积的缓冲液混合退火处理,得到溶液一;将等体积的溶液A、B、C和D混合,进行退火处理,得到溶液二;将溶液一和溶液二分别通过预设的激光共聚焦荧光相关谱光路中进行探测计算,分别获取溶液一和溶液二的荧光分子处于三态的比例p1和p2,以及溶液一和溶液二的相关曲线的y轴截距G1(0)和G2(0),所述DNA双标记效率DDLE通过以下公式计算获得:
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