[发明专利]一种人外周血源性早期内皮祖细胞的培养方法有效
| 申请号： | 201810834407.2 | 申请日： | 2018-07-26 |
| 公开（公告）号： | CN108823149B | 公开（公告）日： | 2022-01-04 |
| 发明（设计）人： | 刘月丽;刘辉;葛浩毅;安彦峰 | 申请（专利权）人： | 海南医学院 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071;C12N5/078 |
| 代理公司： | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人： | 陈欢 |
| 地址： | 570100 海*** | 国省代码： | 海南;46 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种人外周血源性早期内皮祖细胞的培养方法，通过抽取外周静脉血，分离并提取单个核细胞，并诱导其分化为早期内皮祖细胞，且培养过程中严格控制技术参数。本发明方法简单易行，安全性高，且早期内皮祖细胞的得率高(98.8％)，适合大规模的推广应用。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 人外周血源性 早期 内皮 细胞 培养 方法 | ||
【主权项】：
1.一种人外周血源性早期内皮祖细胞的培养方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：将磷酸盐缓冲液和外周静脉血混匀，得到稀释的血液；S2：把稀释的血液加到淋巴细胞分离液上，不要混匀；S3：以400～500g离心40～50分钟，温度控制在18℃～20℃；S4：除去血浆部分，取出单个核细胞层，将单个核细胞层与磷酸盐缓冲液混匀；S5：以400～500g离心10～20分钟，温度控制在18℃～20℃，弃上清，并用15～20mL磷酸盐缓冲液重悬细胞；S6：以400～500g离心10～20分钟，温度控制在18℃～20℃，弃上清，即得单个核细胞；S7：将获得的单个核细胞用EBM完全培养基重悬，调整细胞密度后，放置于人纤维黏连蛋白包被的细胞培养瓶，放入培养箱中；培养至4～5天，即得早期内皮祖细胞。
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