[发明专利]一种制备分子生物级牛血清白蛋白的方法

摘要

本发明属于蛋白质纯化领域，具体涉及一种制备分子生物级牛血清白蛋白的方法。本发明制备分子生物级牛血清白蛋白的方法包括吸附剂分散液制备、吸附剂纯化牛血清白蛋白样品、肝素‑琼脂糖层析柱处理牛血清白蛋白样品、超滤浓缩以及透析处理等步骤。本发明的方法采用硅藻土与Heparin‑sepharose层析柱的结合对牛血清白蛋白样品进行纯化，能够去除牛血清白蛋白样品中的核酸酶，得到分子生物级的牛血清白蛋白；整个纯化过程都在低温环境下进行，最大限度的保持了牛血清白蛋白的活性；并且不涉及DEPC处理，不会对环境造成污染；可以可完全去除牛血清白蛋白中微量的核酸酶，省时省力且回收效率高，便于放大规模。

主权项

1.一种制备分子生物级牛血清白蛋白的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)吸附剂用悬浮液重悬并洗涤3次后，在悬浮液中分散均匀，得到吸附剂分散液，在4℃条件下储存备用；(2)将牛血清白蛋白样品溶解在悬浮液中形成样品分散液，然后加入吸附剂分散液，搅拌后分离并收集上清液；(3)将上清液与吸附剂分散液混合，搅拌后分离并收集上清液，重复两次；将收集的上清液用膜过滤后，得到牛血清白蛋白纯化液1；(4)用肝素‑琼脂糖(Heparin‑Sepharose)层析柱对步骤(3)得到的牛血清白蛋白纯化液1进行纯化，收集穿透峰，得到牛血清白蛋白纯化液2；(5)采用分子截留量为10KD的超滤浓缩管对牛血清白蛋白纯化液2进行超滤浓缩，得到超滤牛血清白蛋白样品3；(6)将超滤牛血清白蛋白样品3采用分子截留量为14000Da的透析袋4℃条件下搅拌透析2‑3h后，更换透析液透析过夜，即得分子生物级牛血清白蛋白。