[发明专利]大肠杆菌基因工程菌及其发酵同步生产L-色氨酸与L-缬氨酸的用途有效

专利信息
申请号: 201810840719.4 申请日: 2018-07-27
公开(公告)号: CN108913642B 公开(公告)日: 2021-08-24
发明(设计)人: 谢希贤;杜丽红;郝亚男;韩亚昆;门佳轩;陈宁;徐庆阳 申请(专利权)人: 天津科技大学
主分类号: C12N1/21 分类号: C12N1/21;C12N15/90;C12N15/70;C12P13/22;C12P13/08;C12R1/19
代理公司: 北京瑞盛铭杰知识产权代理事务所(普通合伙) 11617 代理人: 郭晓迪
地址: 300222 天*** 国省代码: 天津;12
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摘要: 发明提供一种同步高产L‑色氨酸与L‑缬氨酸的大肠杆菌基因工程菌及其用途。所述基因工程菌是在大肠杆菌的基因组上,将色氨酸操纵子的启动子替换为Ptrc启动子的同时引入trpE(S40F)突变;将由Ptrc启动子控制的aroG(S180F)基因整合至tyrR位点;将由Plac启动子控制的serA(H344A,N364A)基因整合至yjiV假基因位点;将由Plac启动子控制的glnA基因整合至ycjV假基因位点;再将Ptrc启动子控制的枯草芽孢杆菌alsS基因整合至yghx假基因位点获得。利用该菌株进行摇瓶发酵可在22‑28h内积累L‑色氨酸达10‑14g/L,同时缬氨酸积累量达5‑7g/L,总产酸能力比色氨酸生产菌株提高了50%左右,同时菌体OD600相差不大,不存在生长问题,但单位菌体产酸能力明显提高了120%,大大提高了碳源和细胞的有效利用。
搜索关键词: 大肠杆菌 基因工程 及其 发酵 同步 生产 色氨酸 缬氨酸 用途
【主权项】:
1.一种同步高产L‑色氨酸与L‑缬氨酸的大肠杆菌基因工程菌,其特征在于,所述基因工程菌是在大肠杆菌的基因组上,将色氨酸操纵子的启动子替换为Ptrc启动子的同时引入trpE(S40F)突变;将由Ptrc启动子控制的aroG(S180F)基因整合至tyrR位点;将由Plac启动子控制的serA(H344A,N364A)基因整合至yjiV假基因位点;将由Plac启动子控制的核苷酸序列如SEQ ID No:4所示的glnA基因整合至ycjV假基因位点;再将Ptrc启动子控制的枯草芽孢杆菌alsS基因整合至yghx假基因位点,获得基因工程菌。
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