[发明专利]一种鲎血血细胞蛋白活性肽的制备方法

摘要

本发明涉及一种鲎血血细胞蛋白活性肽的制备方法，所述制备方法具体包括如下步骤：将鲎血血细胞置于低温‑18℃冷冻12h，4℃融化，反复三次后，在4℃下磁力搅拌10 min，至血细胞破裂；4℃低温离心，速率4000rpm，得到固体沉淀，再用蒸馏水反复冲洗，得到鲎血细胞膜组织；用酶活4000 u/g的胰酶粉酶解鲎血细胞膜组织，酶解条件：pH7.0，60℃～80℃，酶浓度2.2 mg/mL，底物浓度4.0 mg/mL，酶解5h；将酶解液低温离心分离得到上清液，冷冻干燥上清液，获得鲎血血细胞蛋白活性肽。本发明以制备鲎试剂残留的废血细胞膜组织为原料，不仅提高原料利用率、还扩大了鲎血的应用范围，能有效抑制乙酰胆碱酯酶，并有效清除羟自由基，可用于阿尔茨海默病人的治疗和保健。本发明属于天然活性物质提取技术领域。

主权项

1.一种鲎血血细胞蛋白活性肽的制备方法，其特征在于，所述制备方法具体包括如下步骤：S1：将鲎血细胞置于冷冻管，按已设定程序的可程序降温机中每分钟降 1℃～3℃至低温‑15℃～‑20℃间，冷冻11h～13h，然后至0℃～4℃解冻，完全融化，如此反复冻融三次；S2：温度保持在0℃～4℃间，将S1所得鲎血血细胞磁力搅拌8min～13min，致鲎血细胞完全破裂；S3：温度保持在0℃～4℃间，将S2所得破裂鲎血血细胞进行低温离心处理，速率3500rpm～4500rpm，15 min～25 min，然后收集固体沉淀，用蒸馏水冲洗3～5次，至得到鲎血细胞膜组织；S4：用酶活3800u/g～4200u/g的胰酶粉酶解S3所得鲎血细胞膜组织，酶解条件：pH7.0，60℃～80℃，酶浓度1.8mg/mL～2.4mg/mL，底物浓度2.0mg/mL～6.0mg/mL，酶解4h～6h；S5：将S4所得酶解液置于低温冷冻离心机中，温度保持在0℃～4℃间, 速率3500rpm～4500rpm离心分离15min～25min，得到上清液；S6：温度保持在‑50℃，将S5所得上清液冷冻至干燥完全为止，获得鲎血血细胞蛋白活性肽。