[发明专利]一种对T细胞免疫检测点通路进行基因敲除的方法及应用在审
| 申请号： | 201810853111.5 | 申请日： | 2018-07-30 |
| 公开（公告）号： | CN108949693A | 公开（公告）日： | 2018-12-07 |
| 发明（设计）人： | 刘慧莹;许先进 | 申请（专利权）人： | 苏州茂行生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;C12N15/85;A61K35/17;A61P35/00 |
| 代理公司： | 北京精金石知识产权代理有限公司 11470 | 代理人： | 张黎 |
| 地址： | 215000 江苏省苏州市苏州工业*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种利用CRISPR‑Cpf1/sgRNA快速、简单、高效、特异性敲除T细胞免疫检测点通路基因的方法，有效解决了利用CRISPR‑Cas9系统对PD‑1、CTLA‑4、LAG‑3和TIM3基因敲除的缺陷。本发明的具体步骤包括：明确T细胞免疫检测点通路基因的目标DNA区域，根据选定的目标DNA区域，设计sgRNA引物对，并利用CRISPR‑Cpf1系统特异性定向敲除T细胞免疫检测点通路基因。本发明简单易行，免疫检查点敲除T细胞有效性更好，安全性更高。 | ||
| 搜索关键词： | 检测点 通路基因 敲除 目标DNA区域 基因敲除 免疫检查 有效解决 引物 应用 | ||
【主权项】：
1.一种对T细胞免疫检测点通路进行基因敲除的方法，其特征在于，具体包括以下步骤：(1)sgRNA寡核苷酸的设计和构建；(2)sgRNA的功能验证；(3)PBMC细胞的制备；(4)基因敲除T细胞的制备。
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