[发明专利]一种毕赤酵母高效基因敲除方法在审
| 申请号： | 201810853635.4 | 申请日： | 2018-07-30 |
| 公开（公告）号： | CN109082444A | 公开（公告）日： | 2018-12-25 |
| 发明（设计）人： | 李莉玲 | 申请（专利权）人： | 惠州卫生职业技术学院 |
| 主分类号： | C12N15/90 | 分类号： | C12N15/90;C12N1/19;C12R1/84 |
| 代理公司： | 惠州市超越知识产权代理事务所(普通合伙) 44349 | 代理人： | 陈文福;陈惠珠 |
| 地址： | 516000 广东省*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明提供一种毕赤酵母高效基因敲除方法，其特征在于，包含以下步骤：S1.通过质粒pYES2构建敲除质粒pGE1203‑ADE‑URA3；S2.将敲除质粒分别敲入所述毕赤酵母组中目标基因och 1的上游、下游；S3.具有敲除质粒活性的蛋白质识别、剪切所述核苷酸序列，敲除所述目标基因och 1，获得敲除所述目标基因och 1的毕赤酵母。本发明有效改善毕赤酵母对蛋白的糖基化修饰，解决融合蛋白过度糖基化的问题，对毕赤酵母och1基因进行了高效敲除。 | ||
| 搜索关键词： | 敲除 毕赤酵母 质粒 目标基因 高效基因 蛋白质识别 过度糖基化 核苷酸序列 糖基化修饰 融合蛋白 剪切 构建 蛋白 上游 | ||
【主权项】：
1.一种毕赤酵母高效基因敲除方法，其特征在于，包含以下步骤：S1. 通过质粒pYES2构建敲除质粒pGE1203‑ADE‑URA3；S2.将敲除质粒分别敲入所述毕赤酵母组中目标基因och 1的上游、下游；S3. 具有敲除质粒活性的蛋白质识别、剪切所述核苷酸序列，敲除所述目标基因och 1，获得敲除所述目标基因och 1的毕赤酵母。
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