[发明专利]一种检测小麦矮缩病毒DNA的方法在审
| 申请号： | 201810869083.6 | 申请日： | 2018-08-02 |
| 公开（公告）号： | CN108950073A | 公开（公告）日： | 2018-12-07 |
| 发明（设计）人： | 张晓婷;谢源;张艳丽;孙柄剑;周琳;李洪连 | 申请（专利权）人： | 河南农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/682 |
| 代理公司： | 福州科扬专利事务所 35001 | 代理人： | 林朝熙 |
| 地址： | 450003 河*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种检测小麦矮缩病毒DNA的方法，其包括以下步骤：提供特异性识别待测小麦矮缩病毒DNA的DNA分子机器，所述DNA分子机器为一条包含G‑四链体合成模板的核苷酸序列；将所述DNA分子机器与待测样品相混合；提供DNA聚合酶和切口酶，作用于DNA分子机器，发生DNA新链合成、形成单链切口和不断剥离产生富G基因片段的系列反应；提供硫黄素ThT诱导产生G‑四链体结构，并与G‑四链体结合产生荧光；检测和记录该荧光。本发明用于将样品中的小麦矮缩病毒DNA信号转化为G‑四链体，在常温下可实现G‑四链体的不断扩增，将小麦矮缩病毒DNA信高度放大，实现高灵敏度的核酸快速定性分析测定。所述方法特异性强，无需使用价格昂贵或体积庞大的精密温控设备，便于进行快速检测和分析。 | ||
| 搜索关键词： | 病毒DNA 四链体 小麦 种检测 荧光 快速定性分析 生物技术领域 核苷酸序列 四链体结构 特异性识别 待测样品 单链切口 高灵敏度 合成模板 精密温控 快速检测 特异性强 系列反应 信号转化 常温下 切口酶 核酸 扩增 硫黄 新链 诱导 剥离 放大 合成 检测 记录 分析 | ||
【主权项】：
1.一种检测小麦矮缩病毒DNA的方法，特征在于，其包括以下步骤：S1：提供特异性识别小麦矮缩病毒DNA的DNA分子机器，所述DNA分子机器为一条包含G‑四链体互补序列的核苷酸序列；S2：将所述DNA分子机器与待测样品相混合；S3：引入DNA聚合酶和切口酶，作用于DNA分子机器，发生DNA新链合成、形成单链切口、不断剥离产生富G序列片段的系列反应；S4：引入硫黄素T，诱导富G序列片段产生G‑四链体结构，与G‑四链体结合，产生荧光；S5：记录荧光发光情况。
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