[发明专利]寨卡病毒的qPCR检测方法在审

专利信息
申请号: 201810890510.9 申请日: 2018-08-07
公开(公告)号: CN108950077A 公开(公告)日: 2018-12-07
发明(设计)人: 陈国强;时长军;李永旺;王凯民;张嵘;姜珊;朱婷;陆春华 申请(专利权)人: 中华人民共和国苏州出入境检验检疫局;苏州西山生物技术有限公司;江苏出入境检验检疫局动植物与食品检测中心
主分类号: C12Q1/70 分类号: C12Q1/70;C12Q1/6851;C12R1/93
代理公司: 苏州创元专利商标事务所有限公司 32103 代理人: 马明渡;杨超
地址: 215021 江苏*** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 一种寨卡病毒的qPCR检测方法,其特征在于:包括以下步骤:针对寨卡病毒的NS5基因设计了一对引物,上游引物序列如SEQ NO:1所示,下游引物序列如SEQ NO:2所示;引物在ZIKV/Monkey/Uganda/MR766/1947株的靶序列被人工连接到pUC57载体上,形成标准品重组质粒;分别以标准品重组质粒和待测样品中的核酸为模板,进行qPCR扩增反应;反应后采集荧光信号,得到qPCR产物的Ct值并进行熔解曲线分析,当Ct值<36且Tm值在86~87℃之间时,样品中含有鸭坦布苏病毒,为阳性;建立标准曲线,得待测样品含量。本发明方法可以检测非洲型和亚洲型的寨卡病毒,灵敏性高,特异性好。
搜索关键词: 寨卡病毒 待测样品 重组质粒 标准品 检测 熔解曲线分析 上游引物序列 下游引物序列 标准曲线 扩增反应 一对引物 荧光信号 靶序列 灵敏性 核酸 引物 采集 病毒
【主权项】:
1.一种寨卡病毒的引物对,其特征在于:其中一条引物ZIKV‑F为针对寨卡病毒的NS5基因设计的上游引物,该上游引物的序列为5’‑ GCCGCCACCAAGATGAACTGAT‑3’;另一条引物ZIKV‑R为针对寨卡病毒的NS5基因设计的下游引物,该下游引物的序列为5’‑ GGTCGTTCTCCTCAATCCACACTC‑3’ 。
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