[发明专利]一种针对乙型肝炎病毒YMDD基序区耐药突变的方法在审
| 申请号： | 201810916731.9 | 申请日： | 2018-08-13 |
| 公开（公告）号： | CN109234368A | 公开（公告）日： | 2019-01-18 |
| 发明（设计）人： | 徐志勇;秦伟 | 申请（专利权）人： | 武汉千麦医学检验所有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6858 | 分类号： | C12Q1/6858;C12Q1/70 |
| 代理公司： | 武汉红观专利代理事务所(普通合伙) 42247 | 代理人： | 陈凯 |
| 地址： | 430011 湖北省武汉市江岸*** | 国省代码： | 湖北;42 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明提供了一种针对乙型肝炎病毒YMDD基序区耐药突变的方法，属于分子生物学技术领域。具体是运用RNase H2和Taq DNA聚合酶双相酶系统，针对HBVYMDD耐药基因突变rtM204I/V(C区)±rtL180M(B区)设计型特异引物及探针，实现乙型肝炎病毒YMDD基序区耐药突变检测。本发明提供的方法敏感度高，检测快速，稳定性好，封闭式检测，减少了后期污染的可能性。 | ||
| 搜索关键词： | 乙型肝炎病毒 基序 耐药突变 分子生物学技术 耐药突变检测 耐药基因 特异引物 酶系统 敏感度 设计型 检测 双相 探针 突变 污染 | ||
【主权项】：
1.一种针对乙型肝炎病毒YMDD基序区耐药突变检测的方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)样本提取：提取血清中的HBV DNA模板；(2)PCR扩增检测：以步骤(1)提取的HBV DNA为模板，利用以下试剂盒进行PCR扩增：所述试剂盒包括检测rtM204I突变位点的特异性引物序列SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2，检测rtM204V突变位点的特异性引物序列SEQ ID NO.1和SEQID NO.3，检测rtL180M突变位点的特异性引物序列SEQ ID NO.4和SEQ ID NO.5；针对rtM204I/V突变位点对应的探针序列SEQ ID NO.6，针对rtL180M突变位点对应的探针序列SEQ ID NO.7，所述序列SEQ ID NO.6和SEQ ID NO.7的5’端标记有荧光基团，3’端标记有淬灭基团；包括RNase H2和热启动Taq DNA聚合酶的酶混合液，所述RNase H2酶与Taq DNA聚合酶浓度比为1:50～1:500权利要求3所述酶混合液，PCR缓冲液、dNTPs；以及PCR缓冲液、dNTPs；(3)结果判定：根据各荧光通道的信号值来判断是否有扩增，有扩增就代表该荧光通道对应的检测位点为阳性，即有突变存在，没有扩增，就说明该通道对应的检测位点突变低于本试剂盒检测限。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于武汉千麦医学检验所有限公司，未经武汉千麦医学检验所有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201810916731.9/，转载请声明来源钻瓜专利网。
