[发明专利]基于聚酰胺酸和肌氨酸氧化酶的肌氨酸电化学检测方法有效
| 申请号： | 201810922017.0 | 申请日： | 2018-08-14 |
| 公开（公告）号： | CN108982606B | 公开（公告）日： | 2020-09-25 |
| 发明（设计）人： | 李金龙;张永臣;时瑞;滕晓燕;胡琴琴 | 申请（专利权）人： | 南京市第二医院（江苏省传染病医院;南京市公共卫生医疗中心） |
| 主分类号： | G01N27/26 | 分类号： | G01N27/26;G01N27/327 |
| 代理公司： | 南京瑞弘专利商标事务所(普通合伙) 32249 | 代理人： | 冯慧 |
| 地址： | 210003 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明基于聚酰胺酸(PAA)和肌氨酸氧化酶(SOX)构建了一种肌氨酸电化学检测方法，实现复杂样品中肌氨酸的检测。首先对玻碳电极(GCE)进行预处理，将二甲基甲酰胺(DMF)溶液作为溶剂制备PAA溶液，并进行超声处理，然后将上述溶液沉积在GCE表面，并在室温下干燥过夜，随后将均匀分散的戊二醛溶液滴加到上述GCE表面，并在25℃下干燥2小时以形成膜，最后，将SOX溶液滴在改性的GCE上形成SOX层，用于肌氨酸的检测。PAA是具有阳离子络合性质的聚合物，由于其羧基作用，可以作为还原剂来提高该电化学方法的灵敏度，从而实现对肌氨酸的灵敏检测。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 聚酰胺 氨酸 氧化酶 电化学 检测 方法 | ||
【主权项】：
1.一种基于聚酰胺酸和肌氨酸氧化酶的肌氨酸电化学检测方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）聚酰胺酸(PAA)和肌氨酸氧化酶(SOX)在玻碳电极(GCE)上的固定化1)将二甲基甲酰胺(DMF)溶液作为溶剂制备聚酰胺酸（PAA）溶液，并将聚酰胺酸（PAA）溶液超声处理至PAA完全溶解，得超声处理后的聚酰胺酸(PAA)溶液；2)将步骤1）得到的聚酰胺酸(PAA)溶液沉积在玻碳电极(GCE)表面，并在室温下干燥过夜,得到PAA修饰的玻碳电极（GCE）；3）将均匀分散的2.5％戊二醛溶液滴加到步骤2）得到的PAA修饰的玻碳电极(GCE)表面，并在25℃下干燥2小时以在GCE表面形成膜；4）将浓度为1 mg/mL的肌氨酸氧化酶(SOX)溶液滴在步骤3）得到的玻碳电极(GCE)表面，并在4℃下过夜以在GCE表面形成肌氨酸氧化酶(SOX)层；（2）电化学检测用计时电流法在含有不同浓度肌氨酸的0.5M PBS中进行，起始电位为‑0.4V，滴样间隔时间为150 s，其中，0.5M PBS的pH为7.2；用电化学阻抗谱(Electrochemical Impedance Spectroscopy，简称EIS)在含有0.1M KCl的5.0mM [Fe(CN)6]3‑/4‑ 溶液中进行，频率为10‑104Hz。
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