[发明专利]石斛兰内生真菌胞内和胞外石斛碱的提取方法在审
| 申请号： | 201810922244.3 | 申请日： | 2018-08-14 |
| 公开（公告）号： | CN109112170A | 公开（公告）日： | 2019-01-01 |
| 发明（设计）人： | 萨尔赛亚·萨仁德勒;陈集双;石京山;贾启;阿查娜·简;樊小宽;舒福兴 | 申请（专利权）人： | 遵义医学院 |
| 主分类号： | C12P17/18 | 分类号： | C12P17/18;C12R1/645 |
| 代理公司： | 重庆强大凯创专利代理事务所(普通合伙) 50217 | 代理人： | 黄书凯 |
| 地址： | 563000 贵*** | 国省代码： | 贵州;52 |
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| 摘要： | 本方案公开了植物真菌中提取化合物的技术领域，石斛兰内生真菌胞内和胞外石斛碱的提取方法，该方法从石斛兰植物中分离出内生真菌菌株，将内生真菌菌株的菌体和代谢产物进行分离，并将分离后的内生真菌菌体进行冷冻干燥；冻干后的内生真菌菌体研磨成粉末状，使用氯仿浸泡后转移至离心管中进行离心分离；分离后的氯仿相在34～36℃下蒸发得到残留物，将残留物加入氯仿再次溶解后通过孔径为0.22mm的过滤器进行过滤得到胞内石斛碱；代谢产物和氯仿混合后进行离心分离，分离后的氯仿相在34～36℃下蒸发得到残留物，将残留物加入氯仿再次溶解后通过孔径为0.22mm的过滤器进行过滤得到胞外石斛碱。本发明首次从石斛兰的内生真菌中提取分离出石斛碱，扩大了石斛碱的来源。 | ||
| 搜索关键词： | 石斛碱 内生真菌 氯仿 石斛兰 菌体 内生真菌菌株 过滤器 代谢产物 过滤 蒸发 溶解 提取化合物 氯仿浸泡 提取分离 植物真菌 研磨 离心管 冻干 | ||
【主权项】：
1.石斛兰内生真菌胞内和胞外石斛碱的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1)、内生真菌的分离：石斛兰进行表面灭菌处理后，将其接种于培养基上，在23～27℃孵化4～6天，然后分离出内生真菌菌株；步骤2)、内生真菌菌体和代谢产物的分离：利用水循环多功能真空泵将所述内生真菌菌株的菌体和代谢产物进行分离，并将分离后的内生真菌菌体进行冷冻干燥；步骤3)胞内石斛碱的提取：冻干后的内生真菌菌体研磨成粉末状，使用氯仿浸泡后转移至离心管中进行离心分离；分离后的氯仿相在34～36℃下蒸发得到残留物，将残留物加入氯仿溶解后通过孔径为0.22mm的过滤器进行过滤；步骤4)、胞外石斛碱的提取：将步骤2)中的代谢产物和氯仿混合后进行离心分离，分离后的氯仿相在34～36℃下蒸发得到残留物，将残留物加入氯仿溶解后通过孔径为0.22mm的过滤器进行过滤；留取过滤后的滤渣，所述滤渣即为目标提取物。
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