[发明专利]一种快速测定烟草中苯霜灵残留含量的方法

摘要

本发明公开了一种快速测定烟草中苯霜灵残留含量的方法。运用电化学分析法，以苯霜灵作为模板分子，石墨烯纳米材料为基底，利用紫外引发聚合手段将苯霜灵分子印迹膜修饰到丝网印刷电极表面，制得电化学传感器。石墨烯的引入不仅可以增加电子传递速率，且与分子印迹膜结合后，使印迹材料的比表面积增加，电流响应信号增强，提高了传感器的灵敏度，选择性好。方法回收率范围为101.3％‑107.2％；变异系数小于3.1％；检出限和定量限分别为0.003mg Kg‑1、0.01mg Kg‑1。本发明前处理方法简单、操作简便、检测速度快，准确度和精密度高，成本低廉，具有良好的应用前景。

主权项

1.一种快速测定烟草中苯霜灵残留含量的方法，具体采用以下步骤：(1)电化学传感器的制备①石墨烯修饰丝网印刷电极将2mg石墨烯分散于2mL超纯水中，超声1h得到均一的悬浮液备用；将丝网印刷电极置于超纯水中，超声清洗1h，取出晾干后，循环伏安扫描至出现明显氧化还原峰，再用0.05mol L‑1硫酸纯化，纯化后用超纯水清洗掉硫酸，晾干；取5μL备用的石墨烯悬浮液滴涂于晾干的丝网印刷电极上，置于红外灯下15min，得到石墨烯修饰电极；②分子印迹膜修饰丝网印刷电极依次将0.0125mmol苯霜灵Ben、0.05mmol丙烯酰胺AM和0.75mmoL二甲基丙烯酸乙二醇酯EGDMA溶于0.5mL乙腈中，超声振荡5min后静置1h，使Ben与AM充分作用，加入0.24mmol偶氮二异丁腈AIBN，超声溶解后通氮气10min，得到预聚合液；取5μL预聚合液均匀涂在石墨烯修饰电极上，置于波长为365nm紫外灯下3h，取出冷却至室温，得到石墨烯修饰的苯霜灵分子印迹电化学传感器Ben‑MIM/RGO/SPE；将Ben‑MIM/RGO/SPE置于10mL甲醇/乙酸体积比为1:1的洗脱液中搅拌洗脱15min后，去除分子印迹膜中的苯霜灵分子，得到制备好的电化学传感器；(2)待测样品溶液处理称取1.0g待测烟草样品于25mL聚乙烯离心管中，加入10mL乙腈作为萃取液，超声10min，过滤后加入2g NaCl，静置待分层后，取上层乙腈层1.5mL加入试剂包净化，过滤得到待测样品溶液；所述的试剂包为150mg无水硫酸镁和25mg N‑丙基乙二胺键合固相吸附剂的混合物；(3)铁氰化钾缓冲液配制称取0.1646g K3Fe(CN)6和0.7455g KCl，用水定容至100mL容量瓶中，得到铁氰化钾缓冲液；(4)绘制标准工作曲线用乙腈作为溶剂，配制苯霜灵储备液，移取苯霜灵储备液至10mL铁氰化钾缓冲液中，获得浓度为7.0×10‑9到6.8×10‑4范围内的系列标准工作液，绘制标准曲线；所得标准曲线分两段，响应电流△i与Ben的浓度c在7.0×10‑9～2.4×10‑7mol L‑1和2.4×10‑7～6.8×10‑4mol L‑1范围内，线性回归方程分别为△i＝0.7146+19.0143c，相关系数r2＝0.9976和△i＝5.5793+0.0140c(μmol L‑1)(r＝0.9968)，c的单位为μmol L‑1；(5)用电化学工作站进行分析用CHI660型电化学工作站进行检测，采用三电极系统：步骤(1)所得的Ben‑MIM/RGO/SPE电化学传感器为工作电极，铂电极为辅助电极，饱和甘汞电极SCE为参比电极；将三电极系统放入10mL铁氰化钾缓冲液中，平衡，待背景电流稳定后，进行循环伏安CV和差示脉冲DPV的测定；CV测定条件：扫描范围为‑0.2～0.6V，扫描速率为100mV/s；DPV测定条件：扫描范围为‑0.2～0.6V，扫描速率为100mV/s，电位增量为0.004V，振幅为0.05V，脉冲宽度为0.05s，采样宽度为0.016s；(6)结果计算以干基计的苯霜灵残留量R，以毫克每千克表示，按下式计算：式中：R—以干基计的苯霜灵残留量(mg Kg‑1)；C—标准工作曲线计算得到的结果(μmol L‑1)；V—萃取液体积(mL)；M—苯霜灵的摩尔质量(g mol‑1)；m—待测样品质量(g)。