[发明专利]鉴定猪流行性腹泻病毒变异弱毒株YN144的酶切位点及其方法在审
申请号: | 201810922394.4 | 申请日: | 2018-08-14 |
公开(公告)号: | CN109161612A | 公开(公告)日: | 2019-01-08 |
发明(设计)人: | 何启盖;何东贤;陈芳洲;吴美洲;范盛先;张程光;李中华;孟宪荣 | 申请(专利权)人: | 华中农业大学 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11 |
代理公司: | 武汉开元知识产权代理有限公司 42104 | 代理人: | 王和平;冯超 |
地址: | 430070 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明公开了一种鉴定猪流行性腹泻病毒变异弱毒株YN144的酶切位点及其方法。所述酶切位点为ACACGT。该方法首先获取待测目标样品并反转录成cDNA,以所获得的cDNA为模板加入引物对进行RT‑PCR扩增,扩增得到PCR产物后用琼脂糖凝胶电泳法分析,确定是否为猪流行性腹泻病毒变异毒株;当待测目标样品为猪流行性腹泻病毒变异毒株时,使用AflIII酶对PCR产物进行酶切,确定变异毒株是否为猪流行性腹泻病毒变异弱毒株YN144。本发明的RT‑PCR检测敏感度可达到1×100.7TCID50/100μL病毒量或1.27×103copies/μL质粒量;该RT‑PCR方法结合酶切方法,鉴别变异毒株和变异弱毒株YN144。 | ||
搜索关键词: | 猪流行性腹泻病毒 变异毒株 弱毒株 酶切位点 待测目标 酶切 琼脂糖凝胶电泳法 病毒量 反转录 敏感度 种鉴定 扩增 引物 质粒 鉴别 分析 | ||
【主权项】:
1.鉴定猪流行性腹泻病毒变异弱毒株YN144的酶切位点,其特征在于:所述酶切位点为ACACGT。
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