[发明专利]一种检测RYR1基因多态性的多重基因检测试剂盒及其使用方法

摘要

本发明公开了一种检测RYR1基因多态性的多重基因检测试剂盒及其使用方法。本发明采用两管以上多重PCR结合片段长短/质量分析方法，同步快速定性检测与恶性高热易感性相关的RYR1基因35个单核苷酸多态性(SNP)位点。试剂盒组成：用于扩增所述35个SNP位点及内参的4管引物组合物、PCR反应液、4管阳性对照液和无核酸酶水。试剂盒使用方法：(1)采集样本提取核酸，或采集口腔脱落细胞于细胞采集卡上；(2)采用步骤1所述细胞采集卡或提取的核酸为模板进行多重PCR扩增；(3)按PCR产物片段长短/质量同步分离35个SNP位点；(4)结果分析判读。本发明的优势是灵敏度高、特异性强、通量高、成本低，能快速同步检测多个SNP位点，克服了传统方法存在的缺陷。

主权项

1.一种用于检测RYR1基因多态性的多重基因检测试剂盒，其特征在于，包括同步扩增35个SNP位点及内参的4管引物组合物，PCR反应液、4管阳性对照液和无核酸酶水，所述同步扩增35个SNP位点及内参的4管引物组合物详见表1.1～1.4所示；其中，引物组合物Primer Mix A包含了A组9个SNP位点不同基因型的正反向扩增引物及4个内参的正反向扩增引物；引物组合物Primer Mix B包含了B组9个SNP位点不同基因型的正反向扩增引物及4个内参的正反向扩增引物；引物组合物Primer Mix C包含了C组10个SNP位点不同基因型的正反向扩增引物及4个内参的正反向扩增引物；引物组合物Primer Mix D包含了D组7个SNP位点不同基因型的正反向扩增引物及4个内参的正反向扩增引物；表1.1A组SNP位点及内参的引物组合物表1.2B组SNP位点及内参的引物组合物表1.3C组SNP位点及内参的引物组合物表1.4D组SNP位点及内参的引物组合物