[发明专利]小麦HsfA2亚族基因在拟南芥中耐热性的鉴定方法在审
| 申请号： | 201810978147.6 | 申请日： | 2018-08-27 |
| 公开（公告）号： | CN109055423A | 公开（公告）日： | 2018-12-21 |
| 发明（设计）人： | 郭秀林;张园园;段硕楠;李国良;蒋红霞 | 申请（专利权）人： | 河北省农林科学院遗传生理研究所（河北省农林科学院农产品质量安全研究中心） |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;C12N15/66;A01H5/00;A01H6/20 |
| 代理公司： | 石家庄新世纪专利商标事务所有限公司 13100 | 代理人： | 张晓龙 |
| 地址： | 050051 河北*** | 国省代码： | 河北;13 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种小麦HsfA2亚族基因在拟南芥中（Arabidopsis thaliana L.,生态型为Columbia）耐热性的鉴定方法，其包括如下步骤：（A）利用重组的方法将小麦HsfA2亚族基因构建到双元表达载体pCAMBIA1300上；（B）将双元表达载体pCAMBIA1300转化到农杆菌GV3101上；（C）将农杆菌GV3101分别侵染拟南芥野生型和步骤（A）所述小麦HsfA2亚族基因的缺失突变体植株，培养至所述拟南芥植株成熟后，收获种子；（D）筛选得到拟南芥过表达阳性纯合体植株以及拟南芥缺失突变体阳性纯合体植株；进行基础耐热性、获得耐热性及恢复耐热性鉴定。本发明稳定性高、准确性好，同时适合于所有作物HsfA2亚族基因转入拟南芥后纯合株系的耐热性鉴定。 | ||
| 搜索关键词： | 拟南芥 耐热性 亚族 小麦 双元表达载体 基因 纯合体植株 耐热性鉴定 缺失突变体 植株 农杆菌 基因构建 生态型 野生型 纯合 侵染 株系 筛选 转入 收获 成熟 转化 恢复 | ||
【主权项】：
1.一种小麦HsfA2亚族基因在拟南芥中耐热性的鉴定方法，其特征在于，其包括如下步骤：（A）利用重组的方法将小麦HsfA2亚族基因构建到双元表达载体pCAMBIA1300上；（B）制备农杆菌GV3101感受态细胞，将步骤（A）得到的双元表达载体pCAMBIA1300转化到农杆菌GV3101上；（C）将步骤（B）得到的转化后的农杆菌GV3101分别侵染拟南芥野生型和步骤（A）所述小麦HsfA2亚族基因的缺失突变体植株，培养至所述拟南芥植株成熟后，收获种子；（D）筛选经步骤（C）转基因后的拟南芥后代阳性纯合体植株；得到拟南芥过表达阳性纯合体植株以及转拟南芥缺失突变体阳性纯合体植株；（E）对拟南芥过表达阳性纯合体植株进行基础耐热性和获得耐热性鉴定；（F）对转基因拟南芥缺失突变体阳性纯合体植株进行恢复耐热性鉴定。
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