[发明专利]体外检测MUSK-Ab和LRP4-Ab的方法及试剂盒有效
| 申请号： | 201810989134.9 | 申请日： | 2018-08-28 |
| 公开（公告）号： | CN108931513B | 公开（公告）日： | 2021-11-19 |
| 发明（设计）人： | 高峰;韩姣姣;李明强;张迎娜;张婧;赵雪;吕杰;方华 | 申请（专利权）人： | 河南省医药科学研究院 |
| 主分类号： | G01N21/64 | 分类号： | G01N21/64;G01N33/68 |
| 代理公司： | 无锡市汇诚永信专利代理事务所(普通合伙) 32260 | 代理人： | 张欢勇 |
| 地址： | 450000 河*** | 国省代码： | 河南;41 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： |
本发明涉及一种体外检测MUSK‑Ab和LRP4‑Ab的方法及试剂盒。该方法包括以下步骤：取293T细胞，将293T细胞转染pCMV6‑AC‑GFP‑MuSK重组质粒和/或pCMV6‑AC‑GFP‑LRP4重组质粒；向转染pCMV6‑AC‑GFP‑MuSK重组质粒的转染细胞和/或转染pCMV6‑AC‑GFP‑LRP4重组质粒的转染细胞添加多聚甲醛后固定15～30min；磷酸盐缓冲液洗涤之后添加牛血清白蛋白和TritonX‑100进行封闭、通透2～3h；取待测血清，添加封闭、通透后的pCMV6‑AC‑GFP‑MuSK重组质粒的转染细胞和/或封闭、通透的pCMV6‑AC‑GFP‑LRP4重组质粒的转染细胞中，24～28℃下孵育45min～2h，磷酸盐缓冲液洗涤之后加入Alexa Fluor |
||
| 搜索关键词： | 体外 检测 musk ab lrp4 方法 试剂盒 | ||
【主权项】：
1.体外检测MUSK‑Ab和LRP4‑Ab的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)细胞转染重组质粒：取293T细胞，将293T细胞转染pCMV6‑AC‑GFP‑MuSK重组质粒和/或pCMV6‑AC‑GFP‑LRP4重组质粒，得到转染pCMV6‑AC‑GFP‑MuSK重组质粒的转染细胞和/或转染pCMV6‑AC‑GFP‑LRP4重组质粒的转染细胞；2)转染细胞的固定与保存：向步骤2)中的转染pCMV6‑AC‑GFP‑MuSK重组质粒的转染细胞和/或转染pCMV6‑AC‑GFP‑LRP4重组质粒的转染细胞添加多聚甲醛后固定15～30min；磷酸盐缓冲液洗涤之后添加牛血清白蛋白和TritonX‑100进行封闭、通透2～3h，得到封闭、通透的pCMV6‑AC‑GFP‑MuSK重组质粒的转染细胞和/或封闭、通透的pCMV6‑AC‑GFP‑LRP4重组质粒的转染细胞；3)免疫荧光测定：取待测血清，添加至步骤2)中的封闭、通透后的pCMV6‑AC‑GFP‑MuSK重组质粒的转染细胞和/或封闭、通透的pCMV6‑AC‑GFP‑LRP4重组质粒的转染细胞中，室温下孵育45min～2h，磷酸盐缓冲液洗涤之后加入Alexa FluorTM568标记的羊抗人IgG，室温下孵育45min～2h，磷酸盐缓冲液洗涤后使用荧光显微镜的蓝色激发光和绿色激发光激发，观察并拍照记录。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于河南省医药科学研究院，未经河南省医药科学研究院许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201810989134.9/，转载请声明来源钻瓜专利网。
